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乌兰察布市布鲁氏菌临床分离株种型鉴定研究
目的 鉴定临床分离的布鲁氏菌的种型,为布病防控提供参考.方法 用细菌染色法初步判定,用BCSP31-PCR和AMOS-PCR方法进行确证和种型鉴定.结果 10株实验菌株革兰氏染色呈阴性,柯氏染色呈红色;BCSP31-PCR扩增均有清晰明亮约223 bp大小的基因片段;AMOS-PCR将实验菌株鉴定为羊种布鲁氏菌.结论 实验分离鉴定的10株布鲁氏菌均为羊种布鲁氏菌,证实羊种布鲁氏菌为乌兰察布市的主要流行菌种,建议强化动物布病的防控.
关键词： 布鲁氏菌 BCSP31-PCR AMOS-PCR 种型鉴定 -
用PCR法对布鲁氏菌进行筛查及分型鉴定的研究
目的 寻找一种快速检测布鲁菌病的方法,并且用这种方法鉴别布鲁氏菌的种和部分型.方法 根据布鲁氏菌编码312 kDa布鲁氏菌蛋白的基因(BSCP31)和IS711插入序列及相邻单染色体DNA种的不同,设计引物,建立AMOS-PCR方法,用于诊断布鲁氏菌病,并鉴定种.结果 布鲁氏菌蛋白的基因(BSCP31)为引物可以扩增出牛、羊、猪型布鲁氏菌,用IS711插入序列及相邻单染色体设计的引物可以区别不同型别的布鲁氏菌,低可检测到1 pg的布鲁氏菌DNA.结论 AMOS-PCR方法是一种快速、简便、准确的布鲁氏菌病诊断方法,并能鉴定布鲁氏菌的种.
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福建省布鲁氏菌分离株的分子生物学鉴定
目的 利用分子生物学方法鉴定福建省布鲁氏菌分离株.方法 对布鲁氏菌分离株进行AMOS-PCR和MLVA分型.结果 3株福建省分离株经AMOS-PCR鉴定为羊种,与传统生物学分型一致;MLVA分型将其分为3个基因型,聚类分析鉴定为羊种.结论 AMOS-PCR、MLVA分型可以作为我省布鲁氏菌分离株鉴定的辅助手段.
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AMOS-PCR对布鲁氏菌种型鉴定的应用
目的 评价AMOS-PCR方法鉴定布鲁氏菌种型的特异性和实用性.方法 用已建立的AMOS-PCR方法在国内检测标准菌株和对国内分离的布鲁氏菌地方株种型进行检测.结果 羊种布鲁氏菌、牛种布鲁氏菌1,2,4、猪种布鲁氏菌1型和绵羊附睾布鲁氏菌有特异条带.结论 AMOS-PCR 是一种快速、简便、特异的鉴定布鲁氏菌的方法之一.
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用AMOS-PCR对布鲁氏菌种型鉴定的研究
目的 寻找一种快速诊断布鲁氏菌病的方法,并且用这种方法鉴别布鲁氏菌的种和部分型.方法 根据布鲁氏菌IS711插入序列及相邻单染色体DNA种的不同,设计引物,建立AMOS-PCR方法,用于诊断布鲁氏菌病,并鉴定种.结果 在检测的75份样品中,PCR检出14份阳性;细菌分离与PCR诊断的符合率为50%;在SAT为阳性的情况下,PCR检出阳性率为41.18%;有1份样品分菌和SAT检测结果均为阴性,而PCR结果为阳性.结论 AMOS-PCR是一种快速、简便、准确的布病诊断方法,并能鉴定布鲁氏菌的种,区分疫苗(S19)株和野毒株.
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一例输入性布鲁菌病的病原学诊断
目的 分离和鉴定布鲁氏菌,为病例的诊断、治疗及疫情的控制提供科学依据. 方法 无菌采集病人血液标本,接种血培养瓶增菌,转种羊血琼脂平板进行分离培养,用Vitek对分离的菌株进行生化鉴定,应用诊断血清进行血清学分型,用PCR技术检测布鲁菌属特异基因、布鲁菌各型特异性基因. 结果从患者的血液中分离出布鲁菌,经鉴定为羊种布鲁氏菌,布氏菌阳性血清、A因子和M因子血清凝集试验均为阳性. 结论该病例为布鲁菌属羊种布鲁氏菌的实验室确诊病例.
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河北省布鲁菌流行菌株生物学特征分析
目的 了解河北省布鲁菌分离株的生物学特征.方法 应用传统分型鉴定方法和分子生物学方法确定布鲁菌属与种型鉴定.结果 8株分离菌株经传统分型方法鉴定均为羊种菌,羊1型1株,羊3型6株,粗糙型羊种菌1株；进一步采用布鲁菌属特异性BCSP31-PCR均扩增出223 bp的特异性条带；经种/型特异性AMOS-PCR均扩增出731bp的特异性条带,鉴定为羊种布鲁菌.结论 河北省近两年人感染布鲁氏菌的流行菌株为羊种菌3型,AMOS-PCR方法可以作为该省布鲁菌分离株鉴定的辅助手段.
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比较不同方法对新疆部分地区家畜布鲁氏病菌种鉴定
为评估几种方法在家畜布鲁氏菌鉴定中的作用，也为了解新疆部分地区家畜布鲁氏菌不同菌种在牛、羊间的感染率及在不同家畜间的转移情况，在南北疆3个采样点，共收集病原学组织(牛、羊流产胎儿)病料263份。经细菌分离加凝集试验得到20株可疑布鲁氏菌，对上述可疑菌株经VirB8-PCR和AMOS-PCR方法进行进一步鉴定、确定了16个布鲁氏菌株，其中9株为羊种布鲁氏菌，另7株为牛种菌。试验结果显示，采样点家畜中，羊种布鲁氏菌感染率为3.4%，而牛种布鲁氏菌感染率为2.6%。而没发现不同家畜间菌种转移。上述方法中，AMOS-PCR方法有特异性高、便利、快速等特点，在布鲁氏病病原学鉴定中推广和应用价值。
