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  • 广西融水县并殖吸虫虫种的分子鉴别

    作者:林睿;黎学铭;胡文庆;吴忠道;陈守义;孟玮

    用分子生物学方法鉴定广西融水县大小两种并殖吸虫囊蚴感染动物后所获成虫的虫种.在广西融水县采集溪蟹分离获得大小两种囊蚴,感染大鼠后获成虫,曾从形态上鉴定为斯氏狸殖吸虫和巨睾并殖吸虫.但用酚-氯仿法抽提成虫基因组DNA,PCR扩增第二内转录间隔区(ITS2)基因后测序,用Blast程序与GenBank中的斯氏狸殖吸虫、巨睾并殖吸虫等的ITS2基因序列进行同源性检索,用Primer Premier 软件比较其基因差异,用Phylip软件的Neighbor程序绘制其基因进化树后,测得大小囊蚴感染所获成虫的ITS2基因片段分别为437 bp、433 bp,两者的基因同源性为100%,与斯氏狸殖吸虫的基因同源性分别为100% 、99%,与巨睾并殖吸虫的基因同源性分别为91% 、92%;基因序列差异比较,大小囊蚴感染所获成虫与斯氏狸殖吸虫的基因序列差异为0,而与巨睾并殖吸虫存在明显差异;绘制基因进化树,大小囊蚴感染所获成虫与斯氏狸殖吸虫在同一分支同一位置,与巨睾并殖吸虫亲缘关系较远.融水县大小囊蚴感染所获成虫与斯氏狸殖吸虫为同一物种,小囊蚴感染所获成虫并非巨睾并殖吸虫.

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