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免疫捕获PCR文献资料
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免疫捕获PCR法快速检测大肠埃希氏O157∶H7的研究
目的建立两种免疫捕获PCR法快速检测E.coli O157∶H7,并探讨其灵敏度和特异性.方法运用免疫磁珠集菌(IMS)和抗体包被扩增管(mACT)两种方法富集待测样品中E.coli O157∶H7,再应用巢式PCR法检测编码E.coli O157∶H7 O抗原的rfbE基因,对13株E.coli O157菌和10株非E.coli O157菌进行检测.结果应用两种icPCR检测,所有E.coli O157∶H7和E.coli O157:NM菌株均为阳性结果,而其它包括与O157抗血清能交叉凝集的菌株检测结果均为阴性;对于含有4.8×102cfu/ml 以上浓度的E.coli O157∶H7菌悬液,两种方法,所有试验管都能检测到特异性扩增;并证实了这两种方法可用于检测鲜牛奶中E.coli O157∶H7,样品中E.coli O157∶H7的含量只要不少于101cfu/ml,经过6小时增菌均能检测出来.结论 IMS-icPCR和mACT-icPCR用于检测E.coli O157∶H7,是快速、灵敏且高特异的方法.
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副溶血性弧菌的免疫捕获PCR检测
目的:将免疫捕获PCR法应用于副溶血性弧菌检测.方法:将脱毒后的副溶血性弧菌作为抗原免疫家兔,得到抗血清包被PCR管,对待检的副溶血弧菌进行免疫捕获,利用捕获到的菌体作为模板进行PCR检测.结果:PCR体系对副溶血性弧菌的tlh基因扩增具有特异性;抗体对副溶血弧菌起到一定程度的富集作用,包被抗血清后使PCR扩增出来的阳性结果更为明显,而抗血清本身没有扩增出DNA条带.结论:该检测方法能够对副溶血性弧菌进行特异性的检测,同时包被抗体的捕获对提高检测灵敏度起到一定的作用.
