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  • 第三次猪囊尾蚴细胞疫苗免疫实验

    作者:张中庸;李靓如;张京;马春艳;吴莲英

    用人有钩绦虫幼虫-猪囊尾蚴组织进行组织培养,成功地建立了猪囊尾蚴细胞系〔1-3〕,开创了寄生虫学研究的新领域[4],奠定了寄生虫细胞免疫的基础〔5,6〕。为了解猪囊尾蚴组织培养物的两种成份-细胞和细胞生长的代谢产物,各自的免疫作用以及细胞加代谢产物共同的免疫作用,曾先后对疫苗使用对象动物(猪),进行三次规模较大的免疫一攻虫和攻虫-免疫实验。第一次实验于1997年5月2日开始,至同年8月17日结束。用8-12日龄仔猪46头,以猪囊尾蚴组织培养物中单纯的细胞成份制成油乳剂灭活疫苗,按每头猪10、25、50、100、300、500、1000万细胞的剂量,免疫10组动物,一次免疫,35天后攻虫,约2个半月后剖检实验猪,检查虫体。第一次实验获得了用300万细胞疫苗,一次免疫对25000枚虫卵的侵袭达到50%的完全保护,不染一个虫体,该组实验猪平均染虫率7.69%,减虫率达92.31%;而对2500枚虫卵的侵袭同样达到50%的完全保护,未染一个虫体,组平均染虫率1.3%,减虫率达98.7%。如果将两种不同攻虫剂量的结果平均计算,则50%完全保护,染虫率为4.5%,减虫率达95.5%[7]。第二次实验于1998年5月5日开始,至同年12月9日结束,历时228天。用8~12日龄仔猪20头。这次实验首先用单纯细胞疫苗免疫,但不用免疫效果好的300万细胞疫苗,而是用免疫效力较差的10、100、1000万细胞疫苗,这三种疫苗的平均免疫力为6.25%完全保护(1/16),个体染虫3.9枚,染虫率为16.4%,减虫率达83.6%。这就为第二次用细胞加代谢产物疫苗,使其得以发挥免疫治疗作用的机会。因为生猪体内猪囊尾蚴数量越少,或完全没有猪囊尾蚴,则再次免疫的效力将难以判断。第二次免疫是在攻虫前两周进行的,是设想当疫苗开始发挥免疫作用,正当猪囊尾蚴孵化后在体内定位、寄生,有利于细胞免疫反应之时。其结果用1000万细胞加相应量代谢产物疫苗免疫的2头猪,和用2000万细胞加相应量代谢产物疫苗免疫的3头猪,其体内留存的猪囊尾蚴发生囊液丧失,囊壁混浊皱缩、萎陷,囊体缩小,这是由于遇到细胞加代谢产物疫苗的免疫作用,使之发生的免疫反应,猪囊尾蚴活性降低以至消失的退行性变,后可导致虫体完全吸收,纤维化或钙化。这一现象在我们所有用以作为空白对照实验猪体内的猪囊尾蚴中从未出现过,在一次或两次都用细胞加代谢产物疫苗免疫中,也没有发生,在用单纯细胞疫苗一次免疫后没有发生,只是在第一次用单纯细胞疫苗免疫后,临近攻虫前第二次用一定剂量的细胞加代谢产物疫苗免疫的情况下100%的免疫猪,体内的囊尾蚴发生退行性变[8]。猪囊尾蚴免疫细胞系细胞代谢产物的免疫治疗作用的事实是显而易见的,在第二次实验中充分地表现了出来。

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