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PinPointTMXa-3文献资料
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查菲埃立克体28kD表面抗原基因的克隆与表达
目的克隆和高效表达查菲埃立克体(Ehrlichia chaffeensis)28kD表面抗原基因.方法依据已知的查菲埃立克体28kD表面抗原基因设计引物,用PCR从查菲埃立克体基因组中克隆该基因片段(531bp),再将该基因片段定向插入表达载体(PinPointTMXa-3)中,然后将该重组质粒转化E.coli JM109细胞.结果经SDS-PAGE分析,转化子所产生的融合蛋白分子量为32kD,与预期的结果相一致;在37℃用0.1Mm IPTG诱导转化子12h,融合蛋白量达到细菌总蛋白量的35.8%.结论查菲埃立克体28～kD表面抗原基因在E.coli JM109细胞内得到高效率表达,从而为该抗原的大量制备奠定了基础.
关键词： 查菲埃立克体 表面抗原 分子克隆 PinPointTMXa-3
