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EGF和bFGF对体外培养人视网膜色素上皮细胞增殖影响的比较
目的 比较表皮生长因子(EGF)和碱性成纤维细胞生长因子((bFGF)对体外人视网膜色素上皮细胞(hRPE)增殖调控的剂量一效应关系、时间一效应关系,从而筛选出在体外培养hRPE增殖效应较强的生长因子,以提高体外hRPE的培养成效.方法 采用经细胞化学染色法鉴定确认的hRPE细胞株,用CCK-8法检测成组配对的EGF和bFGF(0、2、4、8、16、32ng/ml)在不同作用时间(0、24、48、72、96 h)对体外hRPE增殖的影响.结果 在相同浓度EGF或bFGF作用下,hRPE吸光度值(A值)随作用时间延长而增加,与对照组比较的差异有统计学意义(P<0.05).在相同培养时间条件下,hRPE A值随EGF或bFGF浓度增加而增加,与对照组比较的差异有统计学意义(P<0.05):在相同作用时间下,浓度为4 ng/ml以上时,EGF组的hRPE吸光度值(A值)比bFGF组高且差异有统计学意义(P<0.05).结论 EGF和bFGF对体外培养hRPE增殖的调控有剂量-效应关系和时间-效应关系.同浓度EGF的促进细胞增殖效应强于bFGF.
关键词： 人类视网膜色素上皮细胞 增殖 表皮生长因子 碱性成纤维细胞生长因子 比较 -
不同浓度EGF对体外培养人视网膜色素上皮细胞增殖的影响
目的 探索表皮生长因子(EGF)培养体外人视网膜色素上皮细胞(hRPE)的佳浓度和佳作用时间.方法 用CCK-8法观察EGF对体外hRPE增殖调控的剂量-效应关系、时间-效应关系.结果 在相同浓度EGF作用下,hRPE吸光度值(A值)随作用时间延长而增加；在相同培养时间条件下,hRPE A值随EGF浓度增加而增加,EGF质量浓度＜8 ng/mL的各相邻浓度实验组组间A值比较差异有统计学意义(P ＜0.05)；EGF质量浓度≥8 ng/mL的各相邻浓度实验组组间A值比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 EGF对体外培养hRPE增殖调控存在剂量-效应关系和时间-效应关系,EGF的促增殖作用在8 ng/mL以上逐渐达到饱和.
关键词： 人类视网膜色素上皮细胞 增殖 表皮生长因子 -
人类视网膜色素上皮细胞体外培养的转分化
目的:研究人类视网膜色素上皮细胞(human retinal pig-ment epithelium,HRPE)体外培养的转分化现象.方法:倒置显微镜观察体外培养HRPE细胞形态变化;采用免疫细胞化学染色方法检测HRPE细胞角蛋白及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的变化.结果:HRPE细胞体外培养时形态由上皮细胞特征变化成为间质样细胞;细胞角蛋白表达与传代代数呈负相关(r=-0.831,P<0.001),α-SMA表达与传代代数呈正相关(r=0.456,P=0.002);角蛋白18表达高密度组较低密度组强(t=2.591,P=0.027);而α-SMA表达高密度组较低密度组弱(t=2.938,P=0.015).结论:HRPE细胞体外培养转分化主要是体内外环境差异引起.
关键词： 人类视网膜色素上皮细胞 细胞培养 转分化现象 -
溶血磷脂酸对人类视网膜色素上皮细胞生物学功能的影响研究
目的:研究溶血磷脂酸(Iysophosphatidic acid,LPA)对体外培养人类视网膜色素上皮(human retinal pigment epithelialium,hRPE)细胞增殖活力、分化特性及免疫活性等生物学功能的影响.方法:采用MTT法检测体外培养hRPE细胞增殖活力;角蛋白及α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)免疫细胞化学染色方法分析体外培养hRPE细胞分化特性;流式细胞术检测hRPE细胞表面HLA-ABC、HLA-DR、ICAM-l的表达.结果:加药后第2d开始LPA组吸光度明显高于对照组(P＜0.001);角蛋白18表达对照组较LPA组强(uc=-12.683,P＜0.001),α-SMA表达对照组较LPA组弱(uc=10.402,P＜0.001);hRPE细胞表面HLA-ABC、HLA-DR、ICAM-1的阳性细胞率和平均荧光强度组间差异无统计学意义(各指标均P＞0.05).结论:LPA明显促进hRPE的增殖活力,促进hRPE转分化,在PVR形成过程中起潜在的促进作用,但对hRPE免疫活性无影响.
关键词： 人类视网膜色素上皮细胞 溶血磷脂酸 细胞增殖 转分化 免疫活性
