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循环miRNA-93在DHEA多囊卵巢综合征大鼠模型中的表达及其意义
目的:通过检测多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠血清与卵巢组织中miRNA-93及血管内皮生长因子A(VEGFA)的表达水平,探讨循环miRNA-93及靶基因VEGFA在PCOS发生发展过程中的作用机理与诊断价值.方法:选取3~4周龄雌性(SD)大鼠,随机分为实验组和对照组,每组20只.实验组每日颈背部皮下注射脱氢表雄酮(DHEA),按6mg/100g剂量溶于0.2ml无菌注射用油;对照组每日颈背部皮下注射0.2ml无菌注射用油剂.28天后观察两组大鼠的动情周期、卵巢形态学、性激素、体重、卵巢体积、OGTT血糖、空腹胰岛素、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及血脂等代谢相关指标的变化.RT-PCR法检测大鼠血清和卵巢组织中miRNA-93表达,ELISA法检测血清中VEGFA表达,IHC、Western blot法分析卵巢组织中VEGFA蛋白表达量.结果:实验组大鼠失去规律的动情周期,卵巢体积增大,呈多囊样变,血清FSH、T、LH升高,糖耐量异常,空腹胰岛素及胰岛素抵抗指数明显高于对照组,血清胆固醇、甘油三酯高于对照组,PCOS大鼠模型构建成功.RT-PCR、ELISA、Western blot、IHC等结果显示,miRNA-93及靶基因VEGFA在PCOS大鼠模型的血清、卵巢组织中表达一致且显著升高(P<0.05).结论:miRNA-93在PCOS大鼠模型血清和卵巢组织中呈高表达,可能通过调控其靶基因VEGFA在PCOS发生发展中起重要作用,在PCOS诊断中循环miRNA-93可能作为一种新型非侵入性的诊断标记物.
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miRNA-93在PCOS大鼠血清中的表达
目的 运用脱氢表雄酮(DHEA)诱导SD大鼠多囊卵巢综合征(PCOS)模型,研究模型大鼠的生殖表型和代谢表型.通过检测多囊卵巢综合征大鼠血清中miRNA-93及血管内皮生长因子A(VEGFA)的表达水平,探讨循环miRNA-93及靶基因VEGFA在PCOS发生发展过程中的作用机理与诊断价值意义.方法 选取3～4周龄雌性(SD)大鼠40只,随机分为观察组和对照组,每组20只,观察组每日每100 g体质量颈背部皮下注射DHEA 6mg;对照组每日颈背部皮下注射0.2 mL注射油剂.28 d后观察两组大鼠动情周期、卵巢形态学、性激素、体质量、卵巢体积、OGTT血糖、空腹胰岛素、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及血脂等代谢相关指标的变化.采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测大鼠血清中miRNA-93的表达量,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清中VEGFA的表达.结果 观察组大鼠失去规律的动情周期,卵巢体积增大,呈多囊样变,血清FSH、T、LH升高,糖耐量异常,空腹胰岛素及胰岛素抵抗指数明显高于对照组,血清胆固醇、甘油三酯高于对照组.RT-PCR、ELISA等实验结果显示miRNA-93及靶基因VEGFA在PCOS大鼠模型的血清中表达显著升高(P＜0.05).结论 DHEA可诱导SD大鼠出现与PCOS患者相似的生殖和代谢异常的改变,是研究多囊卵巢综合征生殖及代谢异常的较理想的动物模型.miRNA-93在PCOS大鼠模型血清中高表达,可能通过调控其靶基因VEGFA在PCOS发生发展中起重要作用,在PCOS诊断中循环miRNA-93可以作为一种新型非侵入性诊断标志物.
