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1株壳聚糖酶产生菌的鉴定和产酶条件优化
目的 对产壳聚糖酶菌株Y116进行菌种鉴定,并提高菌株Y116壳聚糖酶的产量.方法 对产壳聚糖酶菌株Y116进行了形态学观察、生理生化特征鉴定和16S rDNA序列同源性分析;采用单因素法和响应面法,对菌株Y116产酶的培养基成分和培养条件进行优化.结果及结论 菌株Y116归属于芽孢杆菌属(Bacil-lus sp.).单因素实验中,酶活力达到高值时各因素的数值分别为:乳糖35 g/L,豆饼粉30 g/L,Mg2+2 mmol/L,NaCl 5 g/L,初始pH 5.0,接种量5％,培养温度30℃和发酵时间96 h.利用Plackett-Burman(PB)设计对影响壳聚糖酶产量的8个主要因素进行评价,确定了豆饼粉浓度、初始pH和Mg2+浓度是影响菌株产酶量的3个主要因素;利用中心组合设计(CCD)及响应面分析,终得到3个主要因素的优值:豆饼粉浓度39.43 g/L,pH 5.94,Mg2+浓度2.05 mmol/L,酶活力比优化前提高了5倍.复使用10次后,其相对酶活仍为42.3％,说明具有良好的批次操作稳定性.该酶经过固定化后热稳定性和pH稳定性均得到了提高.
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1株产α-环糊精葡萄糖基转移酶菌株的产酶条件优化
目的 提高菌株Y112产α-环糊精葡萄糖基转移酶(α-CGTase)的能力.方法 采用单因素法和响应面法,对菌株Y112产酶的培养基成分和培养条件进行了优化.结果 终确定了菌株Y112产酶佳培养基成分为:玉米淀粉7.5 g/L,蛋白胨17.8 g/L,酵母浸粉9.1 g/L,Mn2+0.6 mmol/L,NaCl 50 g/L,Na2CO3 15 g·L-1(pH 9.6);佳产酶的培养条件为:27℃下发酵50 h.结论 优化后的酶活为优化前的2.8倍.
关键词： 海洋芽孢杆菌 α-环糊精葡萄糖基转移酶 产酶条件优化 响应面
