您当前的位置：
首页 > 文献资料
所属专业：
α-环糊精葡萄糖基转移酶文献资料
-
α－环糊精葡萄糖基转移酶的高效表达及酶法制备AA－2G条件优化
目的：构建分泌表达α－环糊精葡萄糖基转移酶（α－Cyclodextrin Glycosyltransferase ，α－CGTase）的重组菌株，并利用该酶液制备AA－2G。方法经PCR扩增浸麻芽孢杆菌154基因组获得α－CGTase基因序列，将该基因序列和pET26b载体分别经Nco I、Xho I双酶切后用T4 DNA连接酶连接，并转化大肠杆菌BL21。利用发酵培养基分泌表达α－CGTase，利用该酶和淀粉糊精、维生素C反应制备AA－2G，并进行制备条件优化。结果在大肠杆菌中实现了α－CGTase的胞外分泌表达，胞外环化酶活力达到120 U／mL，利用该酶的转糖基反应将淀粉糊精、维生素C转化为AA－2G，经HPLC检测正确。结论利用自制α－CGTase得到了AA－2G，通过制备条件优化AA－2G产量为17．46 g／L，转化率达到58．2％（mg／mg）。
关键词： α-环糊精葡萄糖基转移酶 大肠杆菌 维生素C AA-2G 酶法转化 -
1株产α-环糊精葡萄糖基转移酶菌株的产酶条件优化
目的 提高菌株Y112产α-环糊精葡萄糖基转移酶(α-CGTase)的能力.方法 采用单因素法和响应面法,对菌株Y112产酶的培养基成分和培养条件进行了优化.结果 终确定了菌株Y112产酶佳培养基成分为:玉米淀粉7.5 g/L,蛋白胨17.8 g/L,酵母浸粉9.1 g/L,Mn2+0.6 mmol/L,NaCl 50 g/L,Na2CO3 15 g·L-1(pH 9.6);佳产酶的培养条件为:27℃下发酵50 h.结论 优化后的酶活为优化前的2.8倍.
关键词： 海洋芽孢杆菌 α-环糊精葡萄糖基转移酶 产酶条件优化 响应面
