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丙型肝炎病毒包膜糖蛋白E2与CD81分子的研究进展
丙型肝炎病毒(Hepatitis C Virus;HCV)是黄病毒家族中的一种正链RNA病毒,全球大约有一亿七千万人慢性感染HCV.HCV的感染可导致慢性肝炎、肝硬化及肝细胞癌等肝部疾病,而且大多数HCV感染的病例还与冷球蛋白血症、B淋巴细胞增殖疾病相关.虽然目前对HCV的基因组及蛋白结构认识的比较清楚,但由于尚未建立一个完善的HCV体外培养系统,使得对HCV生活周期的认识停滞不前,HCV的致病机制也就成为期待解决的一个难题.
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能结合HCV E2蛋白的人CD81模拟肽的筛选与活性鉴定
目的 用CD81单克隆抗体筛选噬菌体随机展示十二肽库,以期得到可模拟人CD81功能位点、能抑制HCV E2与其受体一人CD81分子结合的小肽.方法 用CD81单抗从噬菌体随机展示十二肽库中筛选人CD81模拟肽,用ELISA鉴定阳性噬菌体克隆;以阳性噬菌体免疫BALB/c小鼠,分析小鼠免疫血清对阳性噬菌体与HCV E2结合的阻断作用;以HCV E2蛋白包被酶标板,检测阳性噬菌体对HCV E2与人CD81分子结合的抑制作用.结果 对十二肽库进行3轮筛选后,经ELISA和DNA测序,鉴定出3个(C4,C13和C16)阳性克隆,与人CD81无同源序列.阳性噬菌体克隆C16免疫小鼠血清能阻断该克隆与HCV E2的结合.C16克隆能以剂量依赖的方式竞争性抑制HCV E2蛋白与人CD81的结合.结论 用人CD81单抗从噬菌体随机展示肽库中筛选出的阳性噬菌体克隆所编码的小肽在功能上能模拟人CD81与HCV E2的结合活性,能竞争性抑制HCV E2与人CD81分子的结合,在抗HCV药物及疫苗研究中具有潜在应用价值.