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不同剂量乙醇对大鼠心肌糖代谢信号传递分子mRNA表达的影响
目的:观察长期摄入不同剂量乙醇对大鼠心肌糖代谢传导通路中主要信号IR、IRS1、IRS2、GLUT4、AMPKα、MEF2基因转录水平的影响,探讨乙醇影响葡萄糖转运的可能机制.方法:雄性Wistar大鼠48只,随机分为对照组、大、中、小剂量乙醇组.乙醇喂养22周,留取左心室肌于液氮中保存.采用RT-PCR检测心肌IR、IRS1、IRS2、GLUT4、AMPKα1和AMPKα2亚基、MEF2A和MEF2D亚型mRNA的表达.结果:与正常对照组相比,除低剂量乙醇组MEF2D mRNA水平无明显变化外,其它饮酒组中各观察指标表达均下降(P<0.01或P<0.05).除IR外,各饮酒组IRS1、IRS2、GLUT4、AMPKα、MEF2A、MEF2D mRNA水平的下降程度与摄入乙醇量存在剂量依赖关系,即摄入乙醇量越大,下降越明显.相关分析表明,GLUT4mRNA的改变与IRS1、IRS2、AMPKα、MEF2A、MEF2D的变化呈正相关,其中GLUT4的表达水平与IRS1、MEF2A有较高相关性(r=0.683,r=0.824,P<0.01).结论:长期摄入乙醇可降低大鼠心肌糖代谢信号分子的表达.
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罗格列酮对高脂饲养大鼠骨骼肌AMPK活性的影响
目的 观察罗格列酮对高脂饲养大鼠骨骼肌AMP激活的蛋白激酶(AMPK)α、葡萄糖转运体4(GLUT4)、胰岛素受体底物1(IRS1)及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)表达的影响,为临床有效的预防和控制脂毒性提供科学依据.方法 雄性Wistar大鼠30只,随机分为对照、高脂和高脂加罗格列酮[1mg/(kg·d)]三组,每组10只.喂养5个月后,采用Real time PCR法测定大鼠骨骼肌中AMPKα1、AMPKα2、GLUT4的mRNA水平,RT-PCR法测定IRS1、PPARγmRNA的表达,Western blot法测定P-AMPK、T-AMPK和GLUT4的含量.结果 高脂组大鼠除AMPKα1和IRS1的mRNA表达无变化外,AMPKα2、 GLUT4、PPARγ的mRNA水平及P-AMPK、T-AMPK、 GLUT4的蛋白水平均比对照组降低(P<0.01或P<0.05).与高脂组相比,罗格列酮显著增加大鼠骨骼肌GLUT4、PPARγ、IRS1的mRNA水平及 P-AMPK、GLUT4的蛋白水平(P<0.01或P<0.05), 而对AMPKα1、AMPKα2的mRNA水平和T-AMPK的蛋白水平无明显影响.结论 罗格列酮可增加高脂喂养大鼠的骨骼肌P-AMPK、GLUT4、PPARγ和IRS1的表达,提示其具有参与改善胰岛素抵抗、缓解脂毒性的作用.