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囊泡单胺转运蛋白2文献资料
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转染VMAT2基因的CHO细胞抵抗多巴胺毒性作用的研究
目的:探讨囊泡单胺转运体(vesicular monamine transporter-2,VMAT2)对多巴胺(dopamine,DA)毒性的抵抗作用.方法:采用细胞免疫荧光染色法测定VMAT2基因在转染的CHO细胞(VMAT2-CHO)中的表达;MTF比色法检测不同浓度DA作用下的野生型CHO(WT-CHO)和VMAT2-CHO细胞存活率;应用ELISA法DA检测试剂盒测定细胞内DA的水平;采用活性氧检测试剂盒测定细胞内活性氧的水平.结果:VMAT2-CHO细胞内有较强的特异性荧光表达,主要定位在核周区域,胞浆中也有散在的荧光;0.25～0.4mmol/L DA作用72 h,VMAT2-CHO细胞存活率显著高于WT-CHO细胞(P＜0.05);0.4 mmol/L DA作用于WT-CHO和VMAT2-CHO细胞24 h,VMAT2-CHO细胞内DA为(199.33±15.155)ng/ml,显著高于WT-CHO细胞(141.4±8.784)ng/ml(P＜0.01);而细胞内活性氧(ROS)水平则由(144.490±5.295)U/106cells增加至WT-CHO细胞的(217.895±15.885)U/106 cells(P＜0.01).结论:转染VMAT2的CHO细胞对DA引起的毒性有显著的抵抗作用.
