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核糖体 S6蛋白激酶4变异体基因表达对乳腺癌细胞增殖的影响
目的:探讨核糖体 S6蛋白激酶4变异体(RSK4m)对乳腺癌细胞株 MDA-MB-231增殖的影响。方法将RSK4m 的过表达载体稳定转染至乳腺癌 MDA-MB-231细胞株中,分别设一个阴性对照组(mock 组)及过表达RSK4m1组(OE1组)、过表达 RSK4m2组(OE2组)、过表达 RSK4m3组(OE3组),采用实时荧光定量 PCR(qRT-PCR)和 Western blotting 检测 RSK4m 的 mRNA 和蛋白的表达,CCK-8试剂盒检测转染后 MDA-MB-231细胞的生长增殖,免疫共沉淀试验(CO-IP)验证热休克蛋白与 RSK4变异体的相互作用。结果成功转染 RSK4m 慢病毒表达载体至乳腺癌 MDA-MB-231细胞,其 mRNA 和蛋白水平均过表达(P 均<0.05)。OE1组、OE2组、OE3组在24、48、72、96 h 的细胞抑制率(%)与 mock 组相比,48、72、96 h 的差异具有统计学意义(P <0.05),CO-IP 结果证实热休克蛋白与 RSK4m 存在相互作用关系。结论 RSK4m 可抑制乳腺癌细胞株 MDA-MB-231的增殖,并可能与 RSK4w 的抑制增殖作用存在着不同的调控机制。
关键词: 核糖体 S6 激酶 4 变异体 乳腺肿瘤 增殖 互作蛋白