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瘦素对HTR8-SVneo细胞增殖的影响及调控机制
目的 研究瘦素(Leptin)对HTR8-SVneo滋养细胞系增殖的影响及对DNA结合和分化抑制剂(ID)分子表达水平的影响,探讨Leptin对HTR8-SVneo细胞增殖作用的调节机制.方法 体外培养HTR8-SVneo滋养细胞,MTT法检测Leptin不同质量浓度(0、10、50、100、250、500 ng/mL)刺激后细胞增殖情况.HTR8-SVneo细胞培养体系中加入Leptin(0、100、500 mg/mL),RT-PCR检测瘦素受体(Leptin R)各亚型表达,实时定量PCR检测ID分子表达,Western Blot检测ID2表达.SiRNA干扰ID2分子后,分为Leptin (0 ng/mL)、Leptin( 100 ng/mL)、Leptin(500 ng/mL)、Leptin(0 ng/mL)+ ID2-siRNA、Leptin( 100 ng/mL)+ ID2-siRNA、Leptin(500 ng/mL)+ ID2-siRNA,MTT检测Leptin对HTR8-SVneo滋养细胞增殖的影响.结果 与Leptin(0 ng/mL)比较,高质量浓度Leptin( 100、250、500 ng/mL)促进HTR8-SVneo细胞增殖(P＜0.05)；HTR8-SVneo细胞表达除HuB219.2外的全部受体亚型；Leptin以剂量依赖方式促进HTR8-SVneo细胞ID2分子及OB-RL表达(P＜0.05)；ID2-siRNA抑制ID2表达并逆转Leptin对滋养细胞增殖的促进作用.结论 Leptin可能通过Leptin R-ID2途径促进HTR8-SVneo细胞增殖,为阐明滋养细胞增殖调控机制提供了新的基础数据.
关键词： 瘦素 瘦素受体 HTR8-SVneo细胞 分化抑制因子2 增殖
