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Met-RANTES 在 rd 小鼠遗传性视网膜变性中的作用
目的：研究CC趋化因子拮抗剂Met-RANTES对rd小鼠视网膜外核层形态的影响，探讨其在rd小鼠遗传性视网膜变性中的潜在治疗作用。方法以出生后7drd小鼠作为研究对象，随机分为5组，分别给予腹腔注射Met-RANTES、PBS和玻璃体腔注射不同浓度Met-RANTES、PBS，直到rd小鼠出生后14d，过量麻醉法处死后摘取眼球制作冰冻切片，HE染色后观察测量视网膜后极部外核层厚度。结果腹腔注射met-RANTES、玻璃体腔注射0．7μlMet-RANTESrd小鼠与对照小鼠视网膜外核层细胞层数无明显变化（P＞0．05）。玻璃体腔注射1．0μlMet-RANTES和1．5μlMet-RANTES眼球视网膜外核层比对照眼球视网膜外核层厚，有统计学差异（P＜0．05）。结论CC趋化因子拮抗剂Met-RANTES对rd小鼠遗传性视网膜变性可能存有潜在治疗作用。
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NADPH氧化酶在rd小鼠遗传性视网膜变性中的活化表达
背景 研究表明,小胶质细胞中烟酰胺二磷酸腺苷(NADPH)氧化酶的活化在中枢神经系统神经元损伤及神经变性疾病中发挥重要作用.已有研究证实NADPH氧化酶在rd小鼠视锥细胞退行性改变中的作用,但关于其在rd小鼠视网膜变性早期视杆细胞病变过程中的作用研究较少. 目的 研究NADPH氧化酶在rd小鼠感光细胞凋亡过程中的活化表达,探讨其在遗传性视网膜变性中的致病作用. 方法 取出生后8、10、12、14、16、18d的rd小鼠各18只,过量麻醉法处死后提取视网膜总RNA和总蛋白,并制备视网膜切片,分别用实时荧光定量PCR及Western blot法测定在rd小鼠感光细胞凋亡过程中视网膜中NADPH氧化酶亚单位gp91phox mRNA及蛋白的定量表达变化;采用免疫组织化学及gp91 phox和CD11b免疫荧光双染法确定gp91 phox在不同鼠龄rd小鼠视网膜中的表达及定位,并与其近交系C57BL/6N小鼠进行比较.结果 实时荧光定量PCR研究证实,C57BL/6N小鼠视网膜中未见gp91 phox mRNA的表达,而生后8d的rd小鼠视网膜中即有少量gp9 1phox mRNA的表达,随着鼠龄的增加,gp91 phox mRNA表达量(gp91phox mRNA/β-actin)逐渐增加,生后14d达到高峰.不同鼠龄rd小鼠视网膜中gp91 phox mRNA表达量差异有统计学意义(F=17.81,P=0.00);生后10、12、14、16、18d的rd小鼠视网膜中gp91phox mRNA表达量均明显高于出生后8d小鼠,差异均有统计学意义(均P＜0.05),以出生后14d表达量高,为1.136±0.370.随着小鼠鼠龄的增加,视网膜中gp91ph ox蛋白表达量(A值)与其基因表达变化趋势一致,不同鼠龄及C57BL/6N对照小鼠间视网膜中gp91 phox蛋白表达的差异有统计学意义(F=354.00,P＜0.01),不同鼠龄rd小鼠出生后视网膜中gp91 phox蛋白表达量均明显高于C57B L/6N对照小鼠,差异均有统计学意义(均P＜0.05).免疫组织化学法检测表明,rd小鼠出生后10 d视网膜内层gp91 phox阳性细胞开始增多,出生后14d达到高峰,外核层也可见到gp91 phox阳性细胞.免疫荧光双染结果显示,gp91 phox与小胶质细胞标志物CD11b共表达,呈现橙色荧光. 结论 NADPH氧化酶在rd小鼠视网膜中的表达随着鼠龄的增长而增多,其表达与小胶质细胞活化及感光细胞的凋亡相平行,提示NADPH氧化酶可能在小胶质细胞活化导致的感光细胞凋亡中发挥致病作用.
