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胃癌组织中鸡卵清蛋白上游启动子转录因子Ⅱ、神经纤毛蛋白2的表达变化及其意义
目的 观察胃癌组织中鸡卵清蛋白上游启动子转录因子Ⅱ(COUP-TFⅡ)和神经纤毛蛋白2(NRP2)的表达变化,并分析COUP-TFⅡ、NRP2表达与胃癌临床病理参数的关系.方法 收集手术切除的新鲜胃癌组织及其癌旁正常胃黏膜组织各60例,采用Western blotting法和免疫组化法检测胃癌组织及正常胃黏膜组织中的COUP-TFⅡ、NRP2,分析COUP-TFⅡ、NRP2表达与胃癌临床病理参数的关系.结果 胃癌组织中COUP-TFⅡ、NRP2阳性表达率分别为70.0％、78.3％,正常胃黏膜组织中COUP-TFⅡ、NRP2阳性表达率分别为30.0％、21.7％.胃癌组织、正常胃黏膜组织中COUP-TFⅡ相对表达量分别为0.84±0.22、0.68±0.34,NRP2相对表达量分别为0.86±0.17、0.58±0.22,胃癌组织中COUP-TFⅡ、NRP2相对表达量均高于正常胃黏膜组织(P均＜0.05).胃癌组织中COUP-TFⅡ、NRP2表达呈正相关关系(r=0.263,P＜0.05).浸润深度为T3、T4的胃癌组织中COUP-TFⅡ、NRP2阳性表达率高于浸润深度T1、T2的胃癌组织(P均＜0.05);中低分化胃癌组织中COUP-TFⅡ、NRP2阳性表达率高于高分化胃癌组织(P均＜0.05);有淋巴结转移的胃癌组织中COUP-TFⅡ、NRP2阳性表达率高于无淋巴结转移的胃癌组织(P均＜0.05).结论 COUP-TFⅡ、NRP2在胃癌组织中高表达,并与胃癌的浸润深度、分化程度及淋巴结转移有关,二者可能协同参与了胃癌的发生和发展.
关键词： 胃肿瘤 胃癌 鸡卵清蛋白基因 鸡卵清蛋白上游启动子转录因子Ⅱ 神经纤毛蛋白2 -
黄苠甲苷抑制COUP-TFⅡ表达对成骨细胞分化的影响及相关分子机制研究
目的:探究黄芪甲苷对小鼠成骨前体细胞系MC3T3-E1细胞分化的影响及相关分子机制.方法:取小鼠胚胎成骨细胞MC3T3-E1经复苏后进行培养,再以成骨细胞分化培养基诱导分化后,应用倒置显微镜、茜素红染色等方法鉴定成骨细胞分化;取对数生长期的MC3T3-E1细胞,构建shRNA COUP-TFⅡ的质粒载体,以慢病毒载体成功转染至MC3T3-E1的细胞,作为阳性对照组;取正常对数生长期细胞根据培养基中所加黄芪甲苷的浓度分为:空白对照组(0 μg/ml)、黄芪甲苷低剂量组(25 μg/ml)、中剂量组(50μg/ml)、高剂量组(100μg/ml);采用ALP活性检测和钙结节染色法评估黄芪甲苷对成骨细胞分化能力的影响;以荧光实时定量PCR (qRT-PCR)及蛋白免疫印迹(Western blot)法测定黄芪甲苷对MC3T3-E1细胞中COUP-TFⅡ基因及蛋白表达的影响.结果:MC3T3-E1细胞培养18天后,细胞重叠生长,经茜红素染色可见大小形态不一的钙结节沉积;阳性对照组及黄芪甲苷处理组MC3T3-E1细胞中ALP活性及钙化结节程度均显著高于空白对照组,黄芪甲苷处理组间对比差异有统计学意义(P＜0.05),阳性对照组与黄芪甲苷高剂量组无显著性差异(P＞0.05);阳性对照组及黄芪甲苷处理组COUP-TFⅡ基因及蛋白表达水平均显著低于空白对照组(P＜0.05),黄芪甲苷处理组间对比差异有统计学意义(P＜0.05),阳性对照组与黄芪甲苷高剂量组无显著性差异(P＞0.05).结论:黄芪甲苷能够通过抑制COUP-TFⅡ表达,促进成骨细胞的分化.
关键词： 黄芪甲苷 鸡卵清蛋白上游启动子转录因子Ⅱ 慢病毒载体 shRNA 成骨细胞分化
