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  • mM-CSF 及其剪切体对淋巴细胞白血病Ramos 细胞增殖的抑制作用

    作者:马翠花;种靖慧;廖金凤;林永敏;卫佳;郑国光

    目的:探讨膜结合型巨噬细胞集落刺激因子( mM-CSF)及其剪切体( mM-CSF-Δ)对淋巴细胞白血病Ramos细胞增殖的抑制作用。方法采用Overlap PCR法构建带有mM-CSF的真核表达质粒pTARGET-mM-CSF,再进一步构建胞内区截短30个氨基酸的表达质粒pTARGET-mM-CSF-Δ,并进行PCR及DNA双向测序鉴定。将空载体pTARGET、pTARGET-mM-CSF、pTARGET-mM-CSF-Δ质粒分别转染Ramos细胞,经G418筛选稳定表达细胞株,并用RT-PCR、Western blotting进行鉴定;MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期。结果成功构建了mM-CSF和 mM-CSF-Δ的真核表达载体,获得了稳定转染细胞株 Ramos-V、Ramos-M 和 Ramos-Δ。 Ramos-M、Ramos-Δ、Ramos-V细胞增殖能力的OD值分别为0.413±0.014、0.384±0.019、0.463±0.037,Ramos-M细胞与Ramos-Δ细胞比较,Ramos-M、Ramos-Δ细胞分别与Ramos-V细胞比较,P<0.05或<0.01。 Ramos-M、Ramos-Δ、Ramos-V细胞处于G0/G1期的比例分别为41.54%±1.22%、45.60%±1.09%、39.20%±1.53%,Ramos-M细胞与Ramos-Δ细胞比较, Ramos-M、Ramos-Δ细胞分别与 Ramos-V 细胞比较, P <0.05或<0.01。结论 mM-CSF、mM-CSF-Δ均能抑制淋巴细胞白血病Ramos细胞增殖,且后者抑制作用更强。

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