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气管组织工程技术文献资料
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转染CXCR4基因支气管上皮细胞向SDF-1的迁移观察
目的 观察转染趋化因子受体CXCR4的人支气管上皮细胞HBE向趋化因子SDF-1的定向迁移情况.方法 免疫荧光和流式细胞仪检测正常HBE细胞中的CXCR4蛋白.构建CXCR4慢病毒表达载体并转染HBE细胞.实时荧光定量PCR和Western blot检测转染CXCR4的HBE细胞中的CXCR4mRNA和蛋白,通过Transwell小室实验观察该细胞向SDF-1的定向迁移情况.结果 正常HBE细胞的CXCR4蛋白表达量较低.成功构建了CXCR4慢病毒表达载体.转染CXCR4的HBE细胞中CXCR4 mRNA和蛋白都有较高水平的表达,且向SDF-1定向迁移的细胞数[SDF-1终浓度分别为1、3、10、30、100、300 nM时到达膜背面的细胞分别为(42.8±2.8)、(47.6±6.2)、(57.8±3.3)、(62.4±5.0)、(89.8±4.7)、(100.0±4.8)、(62.4±5.0)个]较未加入SDF-1时的细胞数[(32.8±2.2)个]显著增加(P均＜0.05),并呈浓度依赖性(P＜0.05).结论 转染趋化因子受体CXCR4的HBE细胞向趋化因子SDF-1的定向迁移明显增加.
