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BrdU单抗免疫组化法观察人工皮肤种子细胞生长
目的研究贵州小型香猪来源的组织工程皮肤自体及同种异体移植后种子细胞生长情况,为复方壳多糖组织工程皮肤临床应用提供实验依据.方法构建猪的组织工程皮肤并于移植后第1、4、8周采集标本,BrdU单抗免疫组化染色,观察移植后种子细胞存活情况.结果猪组织工程皮肤移植后8周BrdU单克隆抗体免疫组化染色阳性.结论笔者构建的组织工程皮肤自体及同种异体移植后种子细胞存活良好.本实验为复方壳多糖组织工程皮肤临床应用提供了有力的实验依据.
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小型香猪复方壳多糖组织工程皮肤的构建及组织学特点
目的 评价制备的小型香猪复方壳多糖组织工程皮肤在组织学方面的特性,为其修复皮肤缺损创面提供实验依据.方法采用传代培养的角质形成细胞和成纤维细胞作为种子细胞,I型胶原作为真皮基质.采用气-液界面方式进行培养,通过苏木精-伊红(HE)染色、比较小型香猪的体外构建组织工程皮肤与正常皮肤的组织学特征,包括表皮、真皮结构.结果制备的复方壳多糖组织工程皮肤表皮细胞增殖活跃,分层分化良好,厚约150 μm,真皮层细胞生长正常,排列有序,与机体皮肤结构相似.结论复方壳多糖组织工程皮肤组织结构良好,符合新型皮肤替代物在治疗皮肤缺损时的组织学要求.
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贵州小型香猪群体遗传结构的RAPD分析
目的分析贵州小型香猪的群体遗传结构.方法用经过筛选的31条引物对贵州小型香猪个体基因组DNA进行RAPD扩增.结果经RAPD反应,共扩增出271条带,其中多态性带79条,多态性带频率在0～71%之间,平均为26.6%.不同个体猪拥有的RAPD条带具有差异,但拥有相同条带的个体猪比率较高.该群体猪的相似系数(F)为0.933(0.830～0.980),平均等位基因频率()为0.742,低平均杂合率()为0.258.结论贵州小型香猪个体间具有较好的遗传一致性和遗传稳定性,其群体分化程度处在一个较低的水平.
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组织工程皮肤自体及异体移植后表皮分化及重建的动物实验研究
目的研究猪组织工程皮肤移植后表皮层角蛋白分化标志的变化情况,为组织工程皮肤临床应用提供实验依据.方法按本科已建立的方法构建猪的组织工程皮肤,进行自体及同种异体移植实验,并于移植后1周、4周、8周取标本,行组织学检查和免疫组化染色,观察移植后组织工程皮肤表皮层角蛋白的表达、表皮细胞分化和重建情况.结果猪组织工程皮肤自体及同种异体移植后均存活,创面达到理想的愈合效果;组织学检查显示表皮分化良好,表皮层广谱角蛋白抗体免疫组化染色阳性;基底层以上细胞角蛋白K10抗体免疫组化染色阳性;基底层细胞角蛋白K5抗体免疫组化染色阳性.结论构建的猪组织工程皮肤自体及同种异体移植后,可获得理想的创面愈合效果,表皮分化和再构建良好,与正常皮肤相似.本实验为组织工程皮肤临床应用提供了有力的实验依据.
