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  • 基于Ag85B mRNA的荧光定量逆转录PCR快速检测活结核分枝杆菌方法的建立和评价

    作者:高文凤;罗影殊;黄偌颖;徐园红;钟晶;刘衡川

    目的 建立评价荧光定量逆转录PCR快速检测活结核分枝杆菌的方法.方法 建立检测Ag85B mRNA的荧光定量逆转录PCR方法,评价其特异性、灵敏度、重复性、区分细菌存活状态及检测临床样本的能力.结果 该方法特异性强,仅扩增结核分枝杆菌.低检出限是50 Copies/反应,菌落灵敏度为1.3×103cfu/ml,重复性好,可有效区分死菌和活菌.以培养法为“金标准”,PCR法的灵敏度为100.00%,特异度为84.38%,符合率为93.15%,Kappa值为0.86.结论 荧光定量逆转录PCR检测方法简便、快速、可靠,能有效区分结核分枝杆菌的存活状态,具有较高灵敏度和特异性,适用于临床样本的检测,为结核病的早期诊断、疗效评价及药敏情况分析提供了技术支持,有利于结核病的防控.

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