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三裂鼠尾草素在CIK细胞增殖及其胃癌细胞杀伤中的作用
目的 分析三裂鼠尾草素在CIK细胞增殖中的作用,探讨其在CIK细胞对胃癌细胞SGC-7901杀伤活性的影响及作用机制.方法 分离健康人体外周血单个核细胞,体外多种刺激因子共同诱导为CIK细胞;予不同浓度三裂鼠尾草素分别加入CIK细胞,于24、48、72 h后CCK8法检测CIK细胞增殖率;流式细胞术检测CIK细胞颗粒酶B(GranzymeB,GraB)、穿孔素(Perforin,PFP)、CD107a的表达;Western blotting检测CIK细胞β-catetin、P-ERK1/2和P-AKT的表达;乳酸脱氢酶释放法检测三裂鼠尾草素对CIK细胞杀胃癌细胞株的活性.结果 三裂鼠尾草素诱导48 h后,CIK细胞3.2～102.4 pmol/L浓度组增殖明显(P＜0.05);25.6 pmol/L浓度组GraB、PFP、CD107a和β-catetin、P-ERK1/2和P-AKT的表达显著高于对照组(P＜0.05);且对SGC-7901的杀伤活性较对照组增强(P＜0.05).结论 三裂鼠尾草素在一定浓度范围内能够促进CIK细胞增殖,并增强其对胃癌细胞SGC-7901的杀伤活性,其机制可能与活化β-catetin、P-ERK1/2、P-AKT和上调PFP、GraB、CD107a的表达有关.
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三裂鼠尾草素对人γδT 细胞杀伤结肠癌SW －620细胞的影响
目的：探讨三裂鼠尾草素对人γδT细胞杀伤结肠癌SW－620细胞的影响。方法分离健康人外周血单个核细胞，异戊烯焦磷酸法体外扩增γδT细胞，不同浓度三裂鼠尾草素诱导人γδT细胞72 h，CCK8法检测γδT细胞增殖率，乳酸脱氢酶释放法检测诱导后γδT细胞对SW－620细胞的杀伤活性，流式细胞术检测诱导后γδT细胞穿孔素（ PFP）、颗粒酶B（ GraB）、CD107a的表达，Western blot检测诱导后γδT细胞p－ERK1／2的表达情况。结果经培养10 d，γδT细胞比例由4.32％增加至83.63％。三裂鼠尾草素浓度为0.0477～195 pmol／L时γδT细胞增殖率显著升高（P＜0.05），浓度为0.191～195 pmol／L时γδT细胞对SW－620细胞的杀伤活性显著增加（P＜0.05）。经三裂鼠尾草素诱导72 h，γδT细胞PFP、GraB、CD107a的表达显著升高（P＜0.05）。三裂鼠尾草素浓度为0.763～195 pmol／L时γδT细胞p－ERK1／2的表达显著增加（ P＜0.05）。结论在一定浓度范围内三裂鼠尾草素能够促进人γδT细胞增殖，增强其对结肠癌细胞SW－620的杀伤活性，其机制可能与 PFP、GraB的表达上调和p－ERK1／2信号通路活化有关。
