您当前的位置：
首页 > 文献资料
所属专业：
遗传印记基因文献资料
-
肝脏特异性表达人遗传印记基因PEG10转基因载体的构建和鉴定
目的 构建小鼠肝脏特异性表达人遗传印记基因PEG10的转基因载体pALB-PEG10-EGFP,为制备转基因小鼠做准备.方法 RT-PCR扩增PEG10基因cDNA序列,克隆人T载体进行酶切、测序鉴定,后将其定向克降至真核表达载体pALB-EGFP中ALB的下游,构建转基因载体pALB-PEG10-EGFP;在Lipofectamine介导下转染LO2细胞,经G418抗性筛选,挑选阳性克隆并扩大培养;采用RT-PCR、Western blot、免疫细胞化学等方法分析PEG10在LO2细胞中的表达和细胞内定位.结果 酶切和测序结果表明pALB-PEG10-EGFP构建成功;稳定转染后的LO2表达有PEG10的mRNA及蛋白,且主要定位于胞浆.结论 重组体pALB-PEG10-EGFP的构建初步奠定了转基因小鼠制备的基础.
-
靶向遗传印记基因PEG10的siRNA真核表达载体的构建及鉴定
目的 构建并鉴定针对遗传印记基因PEG10的siRNA真核表达载体.方法 根据PEG10基因cDNA序列,设计针对目的 基因的4个siRNA靶序列,将其插入H1启动子下游,克隆到真核表达载体psiRNA-hH1neo中,通过酶切鉴定和DNA测序鉴定.结果 酶切鉴定及DNA测序结果显示插入片断正确.结论 本研究成功构建针对PEG10的真核表达载体,可能成为肝癌基因治疗中的一种新型、高效的治疗载体.
