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吡喃葡萄糖甙对培养大鼠视网膜神经细胞的影响
目的观察灯盏细辛主要成份之一4-吡喃酮-3-β-D-吡喃葡萄糖甙(4-pyrone-3-β-D-glucopyraoside, PGP)对培养大鼠视网膜神经细胞的影响,并筛选出其有效浓度.方法 6只生后2～3d Sprague-Dawley大鼠,视网膜采用胰酶消化法制成细胞悬液后接种于经鼠尾胶原处理的96孔培养板(每孔1×105个细胞),同时加入1g.L-1～10-5g.L-1PGP及DMEM,分别培养1、3、5d,用MTT法测量OD值.对部分d5的细胞行Nissel体染色检查.结果培养在鼠尾胶原上的视网膜神经细胞生长良好,部分细胞伸出突起,且少数突起相互连接.Nissel体染色检查示培养5d的存活细胞大部分为神经细胞.各种浓度的PGP对培养细胞形态无影响,药物浓度≥10-2g.L-1时,各培养时期细胞数目明显减少,OD值明显降低(P＜0.001～0.05),在该浓度以下各培养时期细胞数目未见明显减少,OD值仅有轻微下降(P＞0.05).结论 PGP无直接促进培养大鼠视网膜神经细胞生长的作用,药物浓度≤10-3g.L-1时,对培养细胞无毒副作用.
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灯盏细辛单体成分对混合培养鼠视网膜神经节细胞的影响
目的观察灯盏细辛主要单体成分4-吡喃酮-3-β-D-吡喃葡萄糖甙(PGP)和新灯盏花素(NBC)对混合培养鼠视网膜神经节细胞(RGCs)的影响.方法采用胰酶消化法将12只生后2～3天的SD乳鼠视网膜制成细胞悬液,接种于鼠尾胶原包被的96孔培养板培养.分为对照组和各种质量浓度梯度(1×10-3g/L～1×1003g/L)的单体成分实验组,于1,3,5天,用MTT微量自动比色法测量存活细胞的吸光度A值.结果培养在鼠尾胶原上的细胞生长良好,上述质量浓度的PGP和NBC对培养细胞形态无影响.各培养时期实验组吸光度A值与对照组比较无显著性差异(P＞0.05).结论灯盏细辛单体成分PGP和NBC无直接促鼠RGCs在体外存活的作用.
