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沉默 FATE/BJ-HCC-2基因的表达对肝癌细胞迁移及侵袭的影响
目的:研究FATE/BJ-HCC-2基因表达与肝癌细胞迁移及侵袭的关系。方法:体外合成FATE/BJ-HCC-2基因序列特异性小干扰RNA(siRNA),转染肝癌细胞系克隆株5B4,并设非特异性siRNA转染和空白对照组。采用RT-PCR及Western blot方法检测各组细胞中 FATE/BJ-HCC-2 mRNA和蛋白的表达;通过Transwell小室模型检测各组细胞体外迁移及侵袭的能力;激光共聚焦显微镜下观察5B4及空质粒转染的对照细胞( Mock)的骨架结构。结果:各组细胞中FATE/BJ-HCC-2 mRNA和蛋白表达差异有统计学意义(F=15.321,P=0.020),特异性siRNA转染组细胞低于其他2组( P<0.05)。抑制FATE/BJ-HCC-2基因表达后,细胞体外迁移及侵袭的能力降低( F=6.171和10.109,P<0.05)。5B4细胞形态拉长,蝌蚪状,呈现迁移、游走的状态;微丝丰富,形态规则,平行贯穿于细胞全长,细胞膜周围有较多丝状伪足伸出;微管减少,分布不规则。结论:FATE/BJ-HCC-2基因表达促进肝癌细胞的迁移及侵袭。
关键词: FATE/BJ-HCC-2 RNA干扰 肝癌 转移 -
FATE/BJ-HCC-2基因转染对肿瘤细胞生物学行为的影响
目的:观察FATE/BJ-HCC-2基因对肿瘤细胞生物学行为的影响,探讨FATE/BJ-HCC-2与肿瘤进展之间的关系.方法:将FATE/BJ-HCC-2基因转染肝癌细胞系Bel-7402细胞,3H-TdR掺入法和Transwell实验对转染细胞的增殖和侵袭能力进行检测;PCR方法检测细胞内的骨桥蛋白(OPN)和整合素连接激酶(ILK)基因的表达水平.结果:细胞增殖实验结果显示FATE/BJ-HCC-2转染肿瘤细胞的3H-TdR掺入值显著高于Mock细胞的掺入值,统计学分析二者差别有显著性意义(P<0.01).FATE/BJ-HCC-2基因表达促进肝癌细胞系Bel-7402细胞的增殖,并且这种增殖效应可被特异性抗-FATE/BJ-HCC-2抗体所阻断.Transwell实验显示,转染FATE/BJ-HCC-2的细胞,其穿膜数量明显比对照组多,差别有显著的统计学意义(P<0.01).对肿瘤细胞转移相关的细胞信号分子进行检测发现,骨桥蛋白(OPN)和整合素连接激酶(ILK)基因的表达水平上调.结论:肿瘤细胞获得FATE/BJ-HCC-2基因表达后其增殖和侵袭能力增强,FATE/BJ-HCC-2基因表达可能与肿瘤细胞的转移有一定关系.提示CT抗原的表达不仅仅是肿瘤发生中的伴随产物,它可能在肿瘤的发生发展过程中起到一定作用.
关键词: CT抗原 FATE/BJ-HCC-2 生物学功能 基因转染