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特发性弱精子症患者精子中 TCTE3的表达
目的：探讨T复合体相关睾丸表达3（ TCTE3）与特发性弱精子症发生的关系。方法：采用RT-PCR和Western blot方法检测正常成年男性（正常对照）和特发性弱精子症患者各30例精子标本中TCTE3 mRNA和蛋白的表达。结果：TCTE3 mRNA和蛋白在特发性弱精子症组精子中的相对表达量均低于正常对照组（ t＝3．038和2．460，P＝0．005和0．017）。结论：TCTE3表达的降低可能在弱精子症的发生中起着重要作用。
关键词： T复合体相关睾丸表达3 特发性弱精子症 轴丝动力蛋白 -
精子相关抗原6(SPAG6)与TCTE3蛋白间相互作用探讨
目的:探讨精子相关抗原6(sperm associated antigen 6,Spag6)和T复合体相关睾丸表达3(T-complex associated testis expressed 3,TCTE3)之间的相互作用.方法:PCR法观察Tcte3在雄性小鼠各组织中的表达;以小鼠睾丸cDNA为模板,扩增Tete3序列,构建Tcte3/pGADT7、Tcte3/pEGFPN2重组质粒;以Tcte3/pEGFPN2转染CHO细胞和COS-1细胞,免疫荧光染色及Western blot检测TCTE3在细胞中的定位和表达;以Spag6/pGBKT7和Tcte3/pGADT7进行酵母双杂交实验,提取酵母蛋白后采用Western blot检测TCTE3与SPAG6之间是否存在直接的相互作用.结果:Tcte3在睾丸、脑、肝、肾、肺、脾、肌肉中均有表达;酶切和测序鉴定证实Tete3/pGADT7和Tcte3/pEGFPN2重组质粒均构建成功;体外实验发现TCTE3主要在CHO和COS-1细胞质中表达,当与SPAG6质粒共转染后,TCTE3被募集至细胞微管中表达;酵母双杂交实验显示TCTE3/SPAG6组合后,在缺少SD/-Leu/-Trp/-His的培养板上有菌落生成,Western blot显示菌落中TCTE3、SPAG6蛋白表达显著,分子量正确.结论:精子相关抗原SPAG6与TCTE3之间存在直接的相互作用,SPAG6可募集TCTE3至细胞微管中表达.
关键词： 男性不育 精子相关抗原6 T复合体相关睾丸表达3 酵母双杂交 蛋白表达
