首页 > 文献资料
-
神经胶质瘤中 IDH2 R172G突变对基因表观修饰的研究
目的：分析在神经胶质瘤细胞中异柠檬酸脱氢酶2（IDH2）突变后 P15 ink4b 转录水平的变化，寻找和基因表观遗传修饰相关的异常表达的蛋白。重点关注 P15 ink4b 启动子区甲基化水平变化，进而分析 IDH2突变、肿瘤抑制基因 P15 ink4b 、2-HG 和甲基胞嘧啶羟化酶（TET）之间的关系。方法pEGFP-N1、pEGFP-N1-IDH2 M、pEGFP-N1-IDH2 WT 3个质粒转染 C6细胞48h 后，收获细胞 Western Blot 检测抑癌蛋白 P15 ink4b 水平，qPCR 检测 P15 ink4b mRNA 变化，5-hmC 检测试剂盒检测 P15 ink4b 启动子区 CpG 岛，CCGG 位点5-hmC 概率。结果IDH2突变组抑癌蛋白 P15 ink4b表达明显低于对照组。IDH2突变组 P15 ink4b mRNA 水平低于对照组，差异有统计学意义（P ＝0．043）。随着2-羟基戊二酸浓度加大，细胞活性明显增强，差异有统计学意义（P ＜0．05）。pEGFP-N1-IDH2 WT组8个 CCGG 位点第二个C 的5-hmC 的概率都大于80％，而 pEGFP-N1-IDH2 M组都小于1％。结论IDH2突变后产生的2－羟基戊二酸可以抑制 TET 酶活，从而去甲基化程度降低，使得抑癌基因 P15 ink4b 启动子区甲基化程度增强，抑制 P15 ink4b 基因表达，促进细胞增殖迁移。
-
儿童急性白血病端粒酶活性与p15基因表达关系的研究
目的探讨端粒酶活性与pINK4b(p15)基因表达在儿童急性白血病(AL)发病中的关系.方法采用改良端粒重复序列PCR扩增和逆转录聚合酶链反应检测27例儿童AL骨髓单个核细胞端粒酶活性和p15基因表达情况,并与9例正常骨髓单个核细胞端粒酶活性及p15基因表达进行比较.结果初诊时,AL患儿骨髓细胞端粒酶活性(34.5±37.0)TPG较对照组(2.4±2.2)TPG明显增高(P<0.001);AL患儿p15基因表达水平(9.8±16.2)%,明显低于对照组(45.8±16.9)%(P<0.001).AL患儿骨髓细胞端粒酶活性与p15基因表达水平之间无相关关系(r=-0.01304,P＞0.05).结论端粒酶活化和p15基因表达水平降低与急性髓性白血病发展有关,但两者可能通过不同的机制作用于白血病.
