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PreS1(1~65)肽基因文献资料
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HBcAg基因和PreS1(1~65)肽基因真核重组载体的构建和鉴定
目的:构建并鉴定包含人乙型肝炎病毒(HBV)HBcAg基因和PreS1(1~65)肽基因的真核重组载体.方法:采用PCR法扩增HBcAg基因,并通过基因突变在79~80位氨基酸处生成一个Nhe I酶切位点,然后将这段基因连接到真核表达载体pIRES2-EGFP启动子下游的EcoR I和BamH I之间.同时PCR扩增PreS1第1~65氨基酸基因,并在其两端分别引入Nhe I酶切位点,通过酶切、连接,将这段基因插入到HBcAg基因的Nhe I酶切位点上.将构建的重组载体pIREScS1转化大肠杆菌DH5α,分别用上述内切酶双酶切及DNA测序鉴定重组质粒.结果:酶切鉴定示,插入片段大小均与预计相符.测序结果与已知序列结果一致.结论:成功构建了HBcAg基因和PreS1(1~65)肽基因的真核重组载体.