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重组腺病毒介导hPSMA和4-1BBL基因转染小鼠树突状细胞的变化及临床意义
目的:研究hPSMA和4-1BBL基因转染小鼠树突状细胞(DC)后的变化及其在前列腺癌方面的临床意义.方法:以含hPSMA和4-1BBL基因的重组腺病毒载体转染C57BL/6j小鼠骨髓来源的DC,将培养的DC分为阳性组(Ad/hPSMA-IRES-m4-1BBL组)、阴性对照组(Ad5LacZ组)和未转染组,分别加入重组腺病毒、空载质粒腺病毒和生理盐水后,采用流式细胞仪测定腺病毒的转染效率;用相差显微镜、扫描电镜和透视电镜观察DC的形态学变化;用流式细胞仪分析表型变化;用Western blot检测DC hPSMA蛋白的表达.结果:经体外诱导培养后获得的树突状细胞在相差显微镜、透视电镜和扫描电镜下均观察到具有典型形态的成熟DC;流式细胞仪检测腺病毒转染效率为70%,Ad/hPSMA-IRES-m4-1BBL组DC细胞表面MHC-Ⅱ、CD80、CD86较其余两组无明显差异(P>0.05),但4-1BBL有明显提高(P<0.05);Western blot检测DC蛋白表达出PSMA.结论:本实验中获得的DC具有成熟DC的典型特征,DC表面的4-1BBL表达率明显上调,表达出PSMA蛋白.本研究将为DC应用于前列腺癌的生物治疗奠定基础.