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E2F8在胶质瘤组织的表达及其对胶质瘤细胞增殖的作用
目的 观察E2F8在胶质瘤中的表达及其对胶质瘤细胞增殖作用.方法 采用生物信息学分析TCGA不同级别胶质瘤患者E2F8的表达水平差异,收集我院收治的不同级别胶质瘤患者105例和12例正常脑组织,分别采用Western blot、定量聚合酶链反应(qPCR)和免疫组织化学检测E2F8的表达水平差异,分析其表达与患者的预后意义.通过小干扰RNA(siRNA)沉默E2F8,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和集落形成实验观察其对胶质瘤细胞U87增殖的作用.结果 分别生物信息学分析TCGA数据库和采用qPCR、Western blot和免疫组织化学检测临床胶质瘤标本,可见胶质瘤E2F8的表达水平(-1.54±0.68)显著高于正常脑组织(-3.66 ±0.38),Kaplan-Meier分析表明E2F8高表达的胶质瘤患者平均生存时间为22.1个月,低表达患者为37.9个月,差异有统计学意义(P =0.025).进一步采用siRNA沉默U87中E2F8的表达,分别采用CCK-8和集落形成检测,E2F8沉默后,U87-E2F8-siRNA组的吸光度值和集落形成率均显著低于U87-siRNA-NC组(P=0.005).结论 E2F8在胶质瘤中存在显著的高表达现象,可促进胶质瘤细胞的增殖,显著缩短患者生存时间.
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肝细胞性肝癌中E2F8基因受表观遗传学调控的特征
目的 研究在肝细胞性肝癌中表观遗传性调控E2F8基因表达的特征,包括E2F8基因启动子区域甲基化状态、靶向调控E2F8基因的微小RNA(microRNA)在肝细胞性肝癌中的表达谱.方法 分析E2F8基因启动子区域DNA序列的CpG位点分布特征,亚硫酸氢盐修饰DNA后,测序检测肝细胞性肝癌患者的癌组织与癌旁组织中E2F8基因转录起始点处DNA甲基化修饰状态的差异；利用3种不同方法预测靶向结合E2F8基因mRNA的3’-非翻译区域(3’-UTR)的microRNAs,结合肝细胞性肝癌microRNAs芯片表达数据,初步推测肝细胞性肝癌中异常表达microRNAs调控E2F8基因表达的可能性.结果 在E2F8高表达的肝细胞性肝癌病例中,癌组织中E2F8基因转录起始位点附近的DNA甲基化程度显著低于癌旁组织中(P＜0.05)；采用3种不同的方法独立预测靶向调控E2F8的microRNAs,其中7个microRNAs在3种方法中的靶基因均为E2F8,12个microRNAs在两种方法中的靶基因为E2F8.分析肝细胞性肝癌microRNAs表达芯片数据,发现与正常肝脏相比,miR-23b、miR-340、miR-448、miR-499-3p、miR-520d-5p在肝细胞性肝癌组织中的表达量显著下调.结论 肝细胞性肝癌中的异常表观遗传学事件可引起E2F8基因的表达上调.
