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扩增阻滞突变体系文献资料
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锁核酸扩增阻滞荧光聚合酶链反应技术检测结直肠癌患者血浆肿瘤K-ras基因突变
目的 建立锁核酸扩增阻滞突变体系荧光聚合酶链反应(LNA-ARMS-PCR)技术检测血浆K-ras突变方法,探讨该方法替代组织检测K-ras突变的可行性.方法 应用锁核酸标记技术建立LNA-ARMS-PCR检测K-ras突变技术,收集155例结直肠癌患者肿瘤组织及其对应血浆标本,同时检测其中的K-ras突变,分析其符合率.结果 建立的检测技术灵敏度高,质粒混合实验证实其灵敏度高达0.1％.肿瘤原发灶内的异质性分析结果显示本方法可以避免因肿瘤异质性导致的假阳性.血浆与肿瘤组织K-ras突变检测的阳性符合率为35.3％,阴性符合率均为100.0％;Ⅳ期患者血浆与组织突变阳性符合率高达83.3％ (15/18).血浆与组织突变检测符合率与TNM分期及循环游离DNA(cfDNA)水平密切相关.结论 LNA-ARMS-PCR方法检测血浆K-ras突变,可以取代肿瘤组织用于检测K-ras突变,但仅限于晚期转移性患者临床价值高.
