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IL-2联合IL-15提高肾母细胞瘤患儿外周血NK细胞对肿瘤细胞的杀伤作用
目的 观察肾母细胞瘤(WT)患儿外周血NK细胞经IL-2、ILd5扩增后对肾母细胞瘤SK-NEP-1的杀伤作用.方法 以8例WT患儿作为病例组,8例健康体检儿童作为对照组.采集每例外周血4 ml,按Fieoll法分离外周血单个核细胞(PBMC),流式细胞仪检测、分选两组PBMC中CD3+ CD16+ CD56+ NK细胞;另采集病例组和对照组外周血4 ml,分离PBMC后,分两组进行培养[IL-2(100 U/ml)培养组、IL-2(100 U/ml)联合IL-15(10 ng/ml)培养组],流式细胞仪检测、分选培养后CD3-CD16+ CD56+ NK细胞.CCK8法检测在不同效靶比(E∶T分别为5∶1、10∶1、20∶1)(效应细胞:NK细胞;靶细胞:SK-NEP-1)情况下,WT患儿外周血NK细胞经IL-2、IL-15扩增后对SK-NEP-1细胞的杀伤作用.western blot检测培养前、IL-2培养组、IL-2联合IL-15组CD3-、CD16+、CD56+、NK细胞中TNF-α及TNF-β表达情况.结果 病例组和对照组采用IL-2联合IL-15扩增后的NK细胞比例分别增加[(7.3±2.4)％比(21.2±3.2)％],[(4.5±1.6)％比(10.1±3.4)％];数量分别增多(70.60±22.5),(30.12±33.16)倍,(P＜0.05).E∶T为10∶1、20∶1时,与单用IL-2扩增比较,IL-2联合IL-15扩增组的NK细胞对肾母细胞瘤细胞的杀伤作用均增强[(16.3±2.1)比(10.5±1.6)]、[(23.9±3.2)比(13.7±2.5)],(P＜0.05).病例组患儿外周血CD3 CD16+ CD56+ NK细胞采用IL-2联合IL-15培养后TNF-α和TNF-β的表达量,较IL-2组、培养前,均显著增加(P＜0.05).结论 IL-2联合IL-15能够提高患儿外周血NK细胞的比例及数量,增加其分泌TNF的能力,从而提高其对肿瘤的杀伤作用.
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干扰素α-2b联合利巴韦林治疗慢性丙型肝炎患者肝内免疫细胞的变化
目的 观察干扰素α-2b和利巴韦林联合治疗前后慢性丙型肝炎患者肝内免疫细胞动态变化情况,为研究免疫调节疗法提供依据.方法 利用流式细胞计数仪对42例慢性丙型肝炎患者应用联合治疗前及其中11例治疗后患者末梢血和(或)肝脏组织进行分析.结果 与对照组相比慢性丙型肝炎组肝脏内CD56+、CD57+、CD161+细胞及CD56+T淋巴细胞阳性率明显减少(P＜0.01),CD161+T淋巴细胞有减少倾向;CD56+T淋巴细胞表达的CD28可见减少,CD152的表达可见增加(P＜0.05);CD83+CD1a+细胞阳性率有减少倾向,CD80+CD11c+、CD86+CD11c+细胞阳性率明显减少(P＜0.01);显效组减低的CD56+、CD161+、CD56+T、CD161+T、CD80+CD11c+、CD86+CD11c+细胞治疗后可见增加.结论 慢性丙型肝炎患者肝脏内自然杀伤细胞、自然杀伤T淋巴细胞数量及树突状细胞数量和功能减低,联合治疗使细胞免疫功能的抑制得到了改善.
