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肿瘤新生血管生成抑制因子文献资料
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人tumstatin基因的克隆表达及其鉴定
目的 重组表达人tumstatin,为人tumstatin的肿瘤受体显像奠定基础.方法 提取HEK293细胞总RNA,通过RT-PCR扩增人tumstatin基因,导入pMD19-T,测序,然后亚克隆至pET28a,IPTG诱导表达,产物进行SDS-PAGE分析和Western blot鉴定.结果 提取的总RNA经电泳,有清晰的28S和18S两条带.RT-PCR扩增产物长度与理论值750bp相一致.测序证实tumstatin基因正确插入载体中.重组人tumstatin在大肠杆菌中高效表达,表达量约占菌体总蛋白量的30%.Western blot证实所表达蛋白为目的 蛋白.结论 重组人tumstatin蛋白在大肠杆菌中高效表达,为进一步的tumstatin的肿瘤受体显像奠定基础.
关键词： Tumstatin 肿瘤新生血管生成抑制因子 基因克隆和表达
