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质膜钙ATP酶异构体1～3在新生大鼠耳蜗基底膜的表达
目的：通过 Western blot 方法检测质膜钙 ATP 酶异构体1～3（plasma membrane Ca2＋－ATPase isoforms 1～3，PMCA1～3）在新生大鼠耳蜗基底膜（basilar membrane，BM）的表达，并检测PMCA2在单个新生大鼠耳蜗毛细胞纤毛的表达量。方法①取出生后2天（P2）和8天（P8）健康SD大鼠各4只，断头后分离出BM，提取总蛋白，分别取20μg，通过 Western blot法检测BM的PMCA1～3表达。②取P2和P8大鼠BM总蛋白3μg，通过 Western blot方法检测BM的PMCA2的表达。③取4只P8大鼠，分离出BM，提取总蛋白，分别取5、10、20μg总蛋白并取100、400和800 ng牛血清白蛋白（BSA）作为对照组，跑完电泳后将胶分为2部分，部分泳道用于SYPRO染胶，其余泳道用于 Western blot检测PMCA2的表达。结果①在20μg 的 P2和 P8大鼠BM总蛋白中，PMCA1仅有微弱的表达（分别为0．126±0．024、0．131±0．012），PMCA2表达水平较高（分别为4．16±0．528、4．25±0．319），PMCA3几乎没有表达（均为0），三者间差异有统计学意义（P＜0．05）。②在3μg 的P2和P8大鼠BM总蛋白中，P8大鼠PMCA2的表达水平（4．571±0．336）高于P2大鼠（3．622±0．285），差异有统计学意义（P＜0．05）。③PMCA2在单个P8大鼠BM的含量约为2．5 ng。结论 PMCA1～3在新生大鼠耳蜗BM的表达水平不同，PMCA2表达量大，这可能是由于耳蜗毛细胞对这几种PMCA亚型有不同的Ca2＋调节需求。
