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大鼠双侧耳蜗毁损后下丘核生长相关蛋白表达研究
目的 研究大鼠双侧耳蜗毁损后下丘核(inferior colliculus,IC)生长相关蛋白-43(growth-associated protein43,GAP-43)表达水平的变化.方法 成年健康SD大鼠35只,随机分为假手术组(对照组)和耳蜗毁损后3、7、14、21、28、90天组,每组各5只动物.应用耳蜗毁损手术法制备大鼠双侧耳蜗毁损模型,采用免疫组织化学方法检测耳蜗毁损后大鼠下丘核GAP--43的表达.结果 各组大鼠双侧耳蜗毁损后下丘核内GAP-43均有表达,耳蜗毁损各组表达均高于对照组,毁损后3、7、14天GAP-43表达持续上升,14天时达高峰,21、28天逐渐下降,到毁损后90天GAP-43水平略高于正常组;除90天组外,耳蜗毁损各组的GAP-43表达水平与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).各组两耳问差异均无统计学意义.结论 双侧耳蜗去传人损伤后.下丘核内GAP-43表达14天时达高峰,90天时接近正常水平,可能反映了下丘核内神经元的轴突生长及突触重塑情况.
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双侧耳蜗毁损后大鼠听皮层突触素表达的变化
目的 观察双侧耳蜗毁损后大鼠听皮层(auditory cortex,AC)突触素表达水平的变化.方法 30只SD大鼠随机均分为6组:双侧耳蜗毁损后3、7、14、21、30天组及假手术对照组,每组各5只.双侧耳蜗毁损后不同时间行听皮层突触紊二步法免疫组化染色,观察突触素表达的变化.结果 双侧耳蜗毁损后3天突触素表达增高.毁损后7天突触素表达较毁损后3天有所下降,毁损后14、21天突触素表达持续上升,21天时上升到高峰,毁损后30天突触素表达开始下降,除毁损后7天组外,其余各组与假手术对照组差异均有统计学意义.各组左右耳表达差异均无统计学意义.结论 大鼠双侧耳蜗去传人损伤后,突触素表达的动态变化反映了听皮层内神经元突触的重塑情况.
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单侧耳蜗毁损后大鼠下丘核γ-氨基丁酸能神经元的分布及调控
目的研究单侧耳蜗毁损后大鼠下丘核(inferior colliculus, IC)内γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid, GABA)能神经元数量及分布的变化与谷氨酸脱羧酶(glutamic acid decarboxylase, GAD65)表达水平的关系.方法采用免疫组织化学方法,通过计算机图象分析系统分别检测大鼠单侧耳蜗毁损后3、7、30天双侧下丘核内GABA能神经元的数量及GAD65表达水平的变化.结果大鼠下丘核内GABA能阳性神经元主要分布于下丘中央核,单侧耳蜗毁损后3天手术对侧下丘中央核GABA能阳性神经元数目明显减少,术后7天进一步下降,至术后30天,下丘中央核中GABA能神经元数量回升,但仍显著低于手术同侧及正常对照组.术后3天手术同侧及对侧下丘中央核GAD65表达水平较正常对照组分别下降23%(P＜0.05)和41%(P＜0.01).术后7天,双侧下丘GAD65水平均出现回升,但手术对侧仍显著低于正常对照组.手术后30天,下丘核内GAD65表达基本恢复到正常水平.结论耳蜗去传入损伤后,下丘核内GABA能神经元的数量变化与GAD65的水平有关,提示脑干听觉中枢可能通过GABA合成的减少而产生去抑制,从而发生功能重组.但GAD65主要参与对短时程GABA需求变化的调控.
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大鼠单侧耳蜗毁损后脑干听觉中枢谷氨酸脱羧酶的表达
目的:研究大鼠单侧耳蜗毁损后脑干听觉中枢(耳蜗核及下丘)谷氨酸脱羧酶(GAD65)水平在术后不同时间点的变化,探讨大鼠脑干听觉中枢在去传入损伤后功能重组的去抑制过程.方法:采用免疫组织化学方法,通过计算机图像分析系统分别检测大鼠单侧耳蜗毁损后第3,7,30天耳蜗核及下丘GAD65的含量水平.结果:单侧耳蜗毁损后3天手术同侧耳蜗核及双侧下丘GAD65含量水平较正常对照组显著性下降.手术后第7天,手术同侧耳蜗核及双侧下丘GAD65水平均有轻度回升,但仍显著低于正常对照组.手术后第30天,GAD65水平基本恢复到正常水平.手术对侧下丘GAD65水平的下降程度显著低于手术同侧,手术对侧耳蜗核GAD65水平在术后无显著变化.结论:耳蜗去传入损伤后,脑干听觉中枢GAD65含量呈现一明显的动态变化过程,提示听觉中枢可能通过D-氨基丁酸(GABA)合成的减少而产生去抑制,从而发生功能重组.
