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  • PVA水凝胶、海藻酸钠凝胶与羊椎骨支架粘合植入动物体内观察

    作者:马文渊;何惠宇;杨楠;刘勤;王媛

    目的:研究聚乙烯醇水凝胶、海藻酸钠凝胶在生物体内生物相容性及降解速率,为三维快速打印技术构建组织工程骨的研究奠定基础.方法:实验样本分3组,对照组为单纯羊椎骨支架材料,聚乙烯醇水凝胶-羊椎骨支架组为实验1组,海藻酸钠凝胶-羊椎骨支架组为实验2组,分别植入裸鼠体内后术后4、8周后处死,苏木精-伊红染色后观察.结果:术后4周标本可见两实验组和对照组材料皮下可见大量纤维结缔组织及表皮毛细血管,植入材料周围发现有结缔组织增生并有炎细胞浸润,对照组支架材料边缘呈毛刺状,实验两组胶体吸收不明显,支架材料周围有疏松的纤维囊壁形成;术后8周标本可见对照组支架边缘可见毛刺状表现,炎细胞浸润;实验1组表皮下炎细胞明显增多,毛细血管未见明显扩张,支架材料周围未见破骨细胞粘附;实验2组和对照组材料周围组织炎症反应减轻,少量中性粒细胞和浆细胞浸润;实验2组可见破骨细胞粘附,部分凝胶胶体降解,支架骨材料边缘呈毛刺状.结论:对照组和海藻酸钠凝胶组支架实验材料可短期开始吸收;聚乙烯醇水凝胶组短期无吸收.

  • 海藻酸钠凝胶复合异种骨构建组织工程骨及体内成骨

    作者:孙磊;张柏青;陈磊;陶剑锋;江健;孟国林;窦榆生;徐建强;刘丹平;胡蕴玉

    目的 采用海藻酸钠凝胶(sodium alginate,A)复合异种骨的方法,构建骨组织工程载体,观察载体中细胞的生物性能及体内成骨能力,为构建效率更高的骨组织工程载体提供实验依据.方法 取2只2周龄新西兰兔的骨髓,以rhBMP-2(1×10-8mol/L)诱导培养BMSCs.取诱导后第2代BMSCs接种于1%(V/W)A中,培养4 d HE染色观察凝胶中细胞形态.将第2代BMSCs分为单纯DMEM凝胶组和含1%A的DMEM凝胶组,培养7 d后行BMP-2免疫组织化学染色观察.第2代BMSCs与2%(V/W)A的DMEM凝胶混合,负压下复合去抗原牛松质骨(xenograftbone,X),4 d后扫描电镜观察细胞生长情况.取24只裸鼠,随机分为2组(n=12),于两侧股部肌袋中分别植入BMSCs-A-X复合体作为实验组,BMSCs-X复合体作为对照组.于术后2、4周后组织学观察复合体成骨情况,图像分析系统分析各组成骨或软骨的面积百分比.结果 HE 染色观察,培养4 dA中BMSCs细胞形态饱满,细胞悬浮于凝胶中,可见细胞分裂和核分裂相.单纯DMEM凝胶组和含1%A的DMEM凝胶组免疫组织化学观察,细胞分裂增殖正常,伸出多种形态的突起,胞核大,核仁清晰.单纯DMEM凝胶组BMP-2表达阳性率为44.10%4±3.02%;含1%A的DMEM凝胶组为42.40%±4.83%,差异无统计学意义(P>0.05).扫描电镜观察:A均匀复合于X微孔中,不同平面均有细胞生长.植入裸鼠体内2周后,实验组及对照组中均有软骨和骨组织形成;实验组软骨面积百分比为7.31%±0.32%,骨为516%±0.24%;对照组软骨为2.31%±0.21%,骨为2.16%±0.22%;两组差异有统计学意义(P<0.05).术后4周,两组软骨和新生骨小梁及骨髓组织较2周时增多;实验组软骨面积百分比为9.31%±0.31%,骨为7.26%±0.26%;对照组软骨为3.31%±0.26%,骨为2.26%±0.28%;两组差异有统计学意义(P<0.05).术后2、4周同组间比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 以A-X构建骨组织工程载体,符合组织工程载体的超结构原理,大限度地承载细胞,生物性能好,对BMSCs增殖和成骨表型及相关的生物性能无不良影响,在体内成骨效率较高.

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