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蕨麻多酚对糖氧剥夺损伤血管内皮细胞一氧化氮、一氧化氮合酶、内皮素及缺氧诱导因子的影响
目的:研究蕨麻多酚对糖氧剥夺损伤的血管内皮细胞中一氧化氮(NO)、内皮素(ET-1)、内皮型一氧化氮(eNOS)、诱导型一氧化氮(iNOS)及缺氧诱导因子(HIF-1α)的影响.方法:利用混合气体培养箱建立糖氧剥夺损伤的血管内皮细胞模型,用高(2.4 mg·ml-1)、中(1.2 mg·ml-1)、低(0.6 mg·ml-1)浓度的蕨麻多酚处理细胞,以复方丹参滴丸为阳性药物(2.4 mg·ml-1),UV法检测各组细胞培养介质中NO含量和NOS活性;放射免疫法检测ET-1含量;RT-PCR法检测各组细胞HIF-1αmRNA、eNOS mRNA、iNOS mRNA及ET-1 mRNA的表达;Western Blot法检测各组细胞HIF-1α和eNOS蛋白的表达.结果:与正常对照组比较,模型对照组细胞中ET-1含量和NOS活性显著升高,NO含量显著降低,HIF-1αmRNA、ET-1mRNA、iN-OSmRNA和HIF-1α蛋白表达上调,eNOS mRNA和eNOS蛋白表达下调(P<0.01).与模型对照组比较,除低浓度蕨麻多酚组ET-1含量、ET-1mRNA和eNOSmRNA无统计学差异外,蕨麻多酚各浓度组细胞NO分泌量均显著升高,ET-1含量和NOS活性显著下降,HIF-1αmRNA、ET-1mRNA、iNOSmRNA和HIF-1α蛋白表达下调,eNOSmRNA和eNOS蛋白表达上调(P<0.05或P<0.01).与阳性药物组比较,蕨麻多酚各浓度组能够显著降低iNOSmRNA的表达,高、中浓度组能够显著增加eNOSmRNA的表达,降低NOS活性,高剂量组能够进一步增加NO分泌量,降低ET-1含量(P<0.05或P<0.01).结论:蕨麻多酚可能在血管内皮细胞缺氧时通过下调HIF-1α,进而抑制ET-1合成和分泌;上调eNOS,下调iNOS,调控NO合成和分泌;调节NO和ET-1的动态平衡,发挥抗缺氧保护作用.
