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肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体对裸鼠骨肉瘤的治疗作用
目的:观察肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)对裸鼠移植性骨肉瘤的生物学效应,初步探讨TRAIL对的骨肉瘤治疗作用的机制.方法:取对数生长的MG一63骨肉瘤细胞,以5×109/L浓度的细胞悬液0.2ml接种于裸鼠下肢外侧皮下,建立裸鼠肿瘤模型,随机分为3组.以1 μg TRAIL,2 μg TRAIL,100 μl生理盐水腹腔注射,观察肿瘤生长速度,处死裸鼠取血清,应用血清碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测血清碱性磷酸酶的活性,取下瘤体应用TUNEL技术检测瘤体中细胞凋亡情况,应用RT-PCR技术分析TRAIL受体表达的情况.结果:肿瘤生长曲线显示:腹腔注射TRAIL蛋白组与注射生理盐水组相比,裸鼠皮下移植瘤生长更慢,且2μg TRAIL组的抑制作用强于1μg TRAIL组.各实验组间ALP活性无明显差异.细胞凋亡的TUNEL检测显示TRAIL治疗组较生理盐水对照组相比的凋亡细胞出现增加.RT-PCR检测显示骨肉瘤细胞有TRAIL R1、R2、R3 mRNA的表达.结论:在活体水平TRAIL 具有促进骨肉瘤细胞凋亡、抑制肿瘤生长的作用,且这种作用随药物的剂量提高而增强,具有潜在的临床应用价值.
关键词： 骨肉瘤 裸鼠 肿瘤坏死因子相关调亡诱导配体 -
人Trail分子的克隆、表达及鉴定
目的克隆人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis-inducing ligand,Trail)基因,并在原核细胞中进行有效表达及纯化后,获得有生物活性的Trail蛋白.方法采用RT-PCR,从激活的人淋巴细胞中扩增Trail胞外区cDNA,将其克隆至载体pGEM-T中,经酶切和测序后,亚克隆构建重组原核表达载体pGEX-5X-Trail,转化大肠杆菌(HBl01),并进行表达和纯化.结果得到了Trail基因,构建了在HB101中表达的重组质粒pGEX-5X-Trail,纯化后,检测发现重组人Trail融合蛋白(rhTrail)对人肝癌细胞株HepG2有诱导凋亡的作用.结论该文成功地构建了人Trail基因高效表达系统,所表达的rhTrail具有良好诱导肿瘤细胞凋亡的活性,为今后的深入研究打下基础.
关键词： 肿瘤坏死因子相关调亡诱导配体 克隆 基因表达 细胞凋亡 -
肿瘤坏死因子相关调亡诱导配体与肝病
肿瘤坏死因子相关调亡诱导配体(TNF related apoptosis inducing ligand, TRAIL)在机体不同的生理条件下,促进或抑制某些调亡相关基因的表达,调节细胞调亡.TRAIL在病毒性肝炎、肝硬化、肝细胞癌的发生发展及其治疗中也有重要作用,有望成为新一代的抗肿瘤药.
关键词： 肿瘤坏死因子相关调亡诱导配体 调亡 病毒性肝炎 肝细胞癌
