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跨膜肿瘤坏死因子-α文献资料
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EST3-EGFP融合蛋白重组体的构建和表达
目的 构建EST3-EGFP融合蛋白穿梭载体并检测其表达.方法 重叠延伸PCR获取EST3-EGFP融合基因,克隆至pTriEx-4穿梭载体中,重组体转化至细菌Rosetta(De3)pLacI,诱导蛋白的表达,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定表达的融合蛋白;免疫印迹法检测重组蛋白的免疫学活性;荧光显微镜观察转化宿主细菌的发光活性.结果 成功构建了EST3-EGFP重组体;融合蛋白主要分布于表达菌细胞质中;免疫印迹杂交检测表明重组蛋白具有EST3的免疫原性; 诱导后的菌体在荧光显微镜下可见强烈的绿色荧光.结论 成功构建的EST3-EGFP穿梭表达载体具有EST3免疫原性和GFP 发光特性.
关键词： 序列表达标签 增强型绿色荧光蛋白 跨膜肿瘤坏死因子-α
