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泛素偶联酶文献资料
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恶性胸腔积液中生物标志物的研究进展
胸腔积液是临床常见的一种并发症,基于诊断或治疗的目的,常需对胸腔积液患者行胸膜腔穿刺术,并对采集到的胸腔积液进行常规、生化、细菌培养及细胞学等检查.根据病因及性质不同可将胸腔积液分为漏出液和渗出液,但其局限性会导致对胸腔积液性质的误判,所以更加灵敏和特异的检查项目亟需确立.正确判断胸腔积液的性质是疾病治疗有效的前提,目前除了常规检查项目之外,对一些胸腔积液中的生物标志物进行检测作为辅助手段也被用于一些疾病的诊断和鉴别诊断.近年来,随着生物医学技术的进步,越来越多的生物标志物被发现并运用于临床,这些生物标志物的发现对病因学的认识、疾病诊断及鉴别诊断、预后评估都有着不可忽视的重要意义.本文将对数个胸腔积液中生物标志物的新研究进展进行综述.
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人泛素偶联酶UBE2C/UbcH10基因的克隆、原核表达载体的构建及表达
目的 获取泛素偶联酶家族成员之一的UBE2C/UbcH10的基因,构建具有His标签的原核表达载体,在大肠杆菌中表达UBE2C/UbcH10蛋白.方法 利用RT-PCR的方法 从肝癌细胞HepG2中获得UbcH10的基因,克隆到pMD-19T载体中并测序鉴定,酶切回收后插入原核表达载体pET32a(+)中,构建重组表达载体pET32a-UbcH10,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达.结果 重组表达载体pET32a-UbcH10在大肠杆菌BL21中经IPTG诱导4h获得稳定高效的融合表达.重组蛋白以可溶形式存在,大小在29.0 kD左右.结论 UbcH10重组表达载体的成功构建以及重组蛋白的表达,为进一步其结构和功能的研究奠定了基础,有望揭示该蛋白在癌症发生发展过程中的作用.
