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人硫氧还蛋白1文献资料
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人硫氧还蛋白1多克隆抗体制备及对内毒素血症新生大鼠的保护作用
目的 克隆人硫氧还蛋白1(hTrx-1)基因并在大肠杆菌表达体系中进行有效表达,制备其多克隆抗体.初步探讨hTrx-1对内毒素血症新生Sprague-Dawley(SD)大鼠的保护作用.方法 从人胎肝细胞中用RT-PCR的方法得到了hTrx-1全长基因,将它克隆到原核表达载体上,在大肠杆菌诱导表达并纯化,纯化的蛋白免疫SD大鼠,制备多克隆抗体.将新生SD大鼠分为正常组、脂多糖(LPS)组和hTrx-1组(n=12).正常组、LPS组分别予以腹腔注射生理盐水、LPS(5 mg/kg);hTrx-1组于LPS注射前30 min腹腔注射hTrx-1(10 mg/kg).观察正常组、LPS组与hTrx-1组新生大鼠24 h死亡率.结果 成功构建PET-28a-hTrx-1原核表达载体,表达纯化了hTrx-1,获得高效价多克隆抗体.正常组、LPS组与hTrx-1组大鼠24 h的死亡率分别是0、67%、17%(X2=14.400,P<0.01).结论 成功制备了hTrx-1多克隆抗体;初步证明了该蛋白对内毒素血症新生SD大鼠具有保护作用.
