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Caspase-3,-8,-9在铜诱导大鼠原代皮层神经元凋亡中的作用研究
目的 通过建立体外铜诱导神经元模型,观察醋酸铜对大鼠原代皮层神经元凋亡及活化caspase-3,cagpage-8和caspage-9蛋白表达的影响,探索高浓度铜导致大鼠神经元损伤的作用机制.方法 采用不同浓度(20,40,80 μM)醋酸铜诱导体外培养72 h的大鼠原代皮层神经元;M1T法检测神经元活力,Hoechst33258染色和流式Annexin-V/PI法检测神经元凋亡,Western blot法检测不同浓度和时间点活化的caspase-3、cagpase-8和cagpase-9蛋白表达.结果 体外培养的原代皮层神经元经醋酸铜诱导48 h后,凋亡率上升,细胞活力呈浓度梯度下降,活化的caspase-8和cagpase-9在铜诱导4 h 20μM组开始升高,48 h各浓度组表达高,呈时间与浓度梯度依赖;活化caspage-3在铜诱导24 h 20 μM组才开始升高,激活的时间晚于caspase-8和cagpase-9,48 h各浓度组表达高.结论 过量铜可导致体外培养大鼠原代皮层神经元发生凋亡,caspase-3、cagpase-8和caspase-9级联反应在铜诱导皮层神经元凋亡过程中发挥重要调控作用.
关键词: 铜 神经元 半胱氨酸天冬氨酸酶-3 半胱氨酸天冬氨酸酶-8 半胱氨酸天冬氨酸酶9 大鼠