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EBV全基因组基因芯片构建与初步验证
目的:鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC) 高发于中国南方,是一种恶性度较高的肿瘤,与EB病毒关系非常密切.本研究利用前期已经设计和克隆好的EB病毒(EBV)已知和预计的编码基因作为cDNA探针,用于研制EBV微阵列.利用能高产EBV病毒颗粒的B95-8细胞作为检测对象,观测基因芯片检测的效果,已确定是否将来用于临床检测.方法:87个EBV基因探针通过一对设计于载体多克隆两端的引物进行PCR扩增.产物纯化后,探针被打印在Corning玻片上.通过与Cy3标记的B95-8细胞cDNA进行杂交反应,检测B95-8细胞内EBV基因表达.RT-PCR验证检测.结果:利用构建的EBV芯片,成功地在B95-8细胞中检测到了几乎所有的EBV潜伏基因的表达,随后RT-PCR验证了该结果.结论:我们成功地构建了EBV微阵列,且设计的EBV探针检测是有效的.但EBV微阵列是否可以用于鼻咽癌标本的检测还有待进一步证实.
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普济煎液对EB病毒抗原表达的抑制作用
目的:观察普济煎液对EB病毒早期抗原及壳抗原表达的抑制作用.方法:用间接萤光法测定普济煎液对Raji细胞EB病毒早期抗原及B95-8细胞EB病毒壳抗原表达的抑制作用.计算抑制率(IR)=(对照组阳性细胞百分率-药物处理组阳性细胞百分率)/对照组阳性细胞百分率×100％.结果:普济煎液对Raji细胞EB病毒早期抗原及B95-8细胞EB病毒壳抗原表达均有抑制作用,且抑制作用随浓度的增加而增强.结论:普济煎液对EB病毒早期抗原及壳抗原表达有一定抑制作用.
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蛇炮簕对EB病毒壳抗原在体外细胞表达的抑制作用
目的:观察蛇炮簕对EB病毒壳抗原(EBV-VCA)在体外细胞表达的抑制作用.方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法证实蛇炮簕提取液对B95-8细胞无毒性后,采用免疫酶法研究蛇炮簕提取液对B95-8细胞EBV-VCA表达的抑制作用.结果:无毒性浓度的蛇炮簕提取液对正丁酸钠、巴豆油联合激发的EBV-VCA表达有较明显抑制作用,且随浓度增加而抑制作用加强.结论:蛇炮簕有较强的体外抑制鼻咽癌EBV-VCA表达的作用,值得进一步研究.
