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人肺动脉内皮文献资料
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细胞自噬与缺氧诱导的人肺动脉内皮细胞凋亡的相关性研究
目的 人肺动脉内皮细胞(HPAECs)凋亡是肺高压(PH)的始发环节和促发因素,本研究探讨细胞自噬在缺氧诱导的HPAECs凋亡中的作用.方法 HPAECs分为3组,即正常对照组(C组):常氧下培养24 h;缺氧组(H组):缺氧下培养24h;缺氧+自噬特异性抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3MA)(H+3MA)组;3MA 10 mM预处理后再缺氧24 h.MTT法检测细胞活性,Hoechst33342染色法和Annexin V/PI流式法检测细胞凋亡,Western bolt测定细胞线粒体凋亡途径相关蛋白Caspase-3,Caspase-9,Bax,Bcl-2和自噬相关蛋白Beclin-1,Atg-12,LC-3B的表达以及探讨机制.结果 ①H组细胞活性较C组明显降低(P＜0.05),3MA预处理加剧细胞活性降低(P＜0.05);②H组细胞凋亡率较C组显著升高(P＜0.05),3MA预处理进一步导致细胞凋亡(P＜0.05);③H组细胞Caspase-3、Caspase-9的表达及Bax/Bcl-2表达比率较C组明显升高(P＜0.05),3MA预处理进一步促进Caspase-3、Caspase-9的表达及Bax/Bcl-2表达比率的升高(P＜0.05);④H组细胞LC-3BⅡ/LC 3BⅠ、Beclin-1和Atg-12的表达均较C组明显增加(P＜0.05),3MA预处理抑制上述蛋白的表达(P＜0.05).结论 缺氧诱导HPAECs通过线粒体途径凋亡,缺氧诱导的细胞自噬抑制HPAECs凋亡.
