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  • 抗副溶血弧菌TLH蛋白多克隆抗体的制备及其ELISA双抗体夹心检测法的研究

    作者:杜玉萍;陈清;柯雪梅;俞守义

    目的 分别制备抗副溶血弧茵及其不耐热溶血毒素(thermolabile hemolysin,TLH)的多克隆抗体,建立检测副溶血弧茵TLH的酶联免疫吸附试验(ELISA)双抗体夹心法.方法 以副溶血弧茵及其TLH分别免疫健康雄性新西兰大白兔和雌性BALB/C小鼠,制备兔抗副溶血弧茵多克隆抗体及小鼠抗TIM多克隆抗体,以间接ELISA法检测两种抗体效价,并以棋盘法筛选两种多克隆抗体用于夹心检测TLH的效价.结果 兔抗副溶血孤茵多克隆抗体效价达1:6400,鼠抗TLH多克隆抗体效价为1:102 400,经筛选确定以1:800稀释的兔抗副溶血弧茵多克隆抗体包被酶标板.与1:1600稀释的鼠抗TLH抗体建立了ELISA双抗体夹心法.结论 兔抗副溶血弧茵多克隆抗体可与TLH呈特异性反应,以此建立的双抗体夹心法检测副溶血弧茵TLH可获较满意结果,此实验可为进一步建立简便、快速的副溶血弧茵检测方法奠定基础.

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