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Smad信号双抑制剂文献资料
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单层分化法结合Smad信号双抑制剂诱导hiPSCs分化为运动神经元
目的 探讨单层细胞分化法结合Smad信号双抑制剂,诱导人诱导多能干细胞(hiPSCs)分化为神经干细胞,并进一步分化为运动神经元的可行性.方法 无血清E8培养基培养hiPSCs,当其接近70％融合度时改用神经诱导培养基,并加入SB431542和DMH1.9d后将贴壁细胞消化,在含bFGF和EGF的培养基中悬浮培养,免疫荧光检测神经干细胞标记物的表达.在神经干细胞培养液中添加视黄酸(RA)和音猬因子(SHH),免疫荧光检测各分化阶段运动神经元相关标记物的表达.结果 经9d神经诱导,hiPSCs分化为表达Nestin、Sox1和Sox2的神经干细胞.神经干细胞在RA和SHH等的作用下进一步分化为运动神经元,免疫荧光检出各不同阶段标志物的表达.结论 单层分化法结合Smad信号双抑制剂,可将hiPSCs诱导为神经干细胞,并在RA和SHH等作用下进一步分化为运动神经元.
关键词： 人诱导多能干细胞 单层分化法 神经干细胞 运动神经元 Smad信号双抑制剂
