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硫酸铍诱导人胚肺成纤维细胞凋亡机制研究
目的：观察硫酸铍对人胚肺成纤维细胞（ MRC-5细胞）凋亡的影响。方法取离体培养MRC-5细胞，随机分为对照组，硫酸铍低、中、高剂量染毒组，拮抗剂组和激活剂组。前4组硫酸铍染毒终浓度分别为0、1、10、100μmol／L；拮抗剂组先后分别予终浓度均为10μmol／L的硫酸铍和2-氨基乙酯二苯基硼酸联合处理；激活剂组先后分别予终浓度均为10μmol／L的硫酸铍和肌醇三磷酸（ IP3）联合处理。各组染毒后分别于培养24和48 h时间点收获细胞，采用流式细胞仪检测细胞凋亡率，激光共聚焦法检测细胞内钙离子（ Ca2＋）浓度，实时荧光定量聚合酶链式反应法检测三磷酸肌醇受体Ⅲ型（IP3RⅢ）和B细胞淋巴瘤-2（BCL-2）的mRNA相对表达水平，酶联免疫吸附法测定IP3 RⅢ和IP3蛋白表达水平。结果在24和48 h时间点的细胞凋亡率，硫酸铍3个剂量组均低于同时间点对照组（P＜0.05），拮抗剂组分别低于同时间点对照组和硫酸铍中剂量组（P＜0.05）；激活剂组48 h时间点细胞凋亡率低于同时间点的对照组（P＜0.05），高于同时间点硫酸铍中剂量组（P＜0.05）。24 h时间点细胞内Ca2＋浓度，在硫酸铍低剂量组低于对照组（P＜0.05），硫酸铍高剂量组高于对照组（P＜0.05）；48 h时间点硫酸铍中和高剂量组细胞内Ca2＋浓度均低于对照组（P＜0.05）；分别与24、48 h时间点对照组和硫酸铍中剂量组比较，拮抗剂组细胞内Ca2＋浓度均下降（P＜0.05），激活剂组细胞Ca2＋浓度均升高（P＜0.05）。24和48 h时间点BCL-2 mRNA表达水平在硫酸铍3个剂量组、拮抗剂和激活剂组均高于同时间点对照组（ P＜0.05）。细胞IP3 RⅢmRNA表达水平在硫酸铍3个剂量组、拮抗剂和激活剂组均高于对照组（ P＜0.05）。24 h时间点IP3 RⅢ蛋白表达水平在硫酸铍中剂量组、拮抗剂组和激活剂组均低于对照组（P＜0.05）；48 h时间点IP3RⅢ蛋白表达水平，在硫酸铍高剂量组低于对照组（ P＜0.05），拮抗剂和激活剂组均高于硫酸铍中剂量组（ P＜0.05）。细胞IP3蛋白表达水平在硫酸铍低、中剂量组以及激活剂组均高于对照组（ P＜0.05），激活剂组高于硫酸铍中剂量组（ P＜0.05）。结论硫酸铍可能通过调节IP3 R／Ca2＋通路，改变细胞内Ca2＋浓度，抑制MRC-5细胞凋亡；IP3可以改善硫酸铍引起的MRC-5细胞内Ca2＋下降。
