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抗褐化剂对明党参悬浮细胞生长和次生代谢产物含量的影响
目的:探讨不同抗褐化剂对明党参悬浮细胞数目、发生褐化反应底物酚类及明党参的有效成分香豆素的影响.方法:在轻度褐化的明党参悬浮细胞中添加不同浓度的维生素C(VC)、活性炭(AC)、酸水解酪蛋白(AHC)、硫代硫酸钠(Na2S2O3)以及聚乙烯吡咯烷酮(PVP),利用紫外分光光度法和高效液相色谱法检测酚类、总香豆素及佛手酚、佛手柑内酯含量.结果:低浓度PVP、VC均不同程度促进明党参悬浮细胞的生长;不同抗褐化剂对酚类含量高低影响不同;VC处理后悬浮细胞中总香豆素含量明显增高,其中用2 mg/mL的VC处理后,总香豆素增长率为51.53％,是对照组的4.8倍,将该浓度VC添加到以水杨酸作为诱导子的明党参悬浮培养液中,改善了水杨酸的促进褐化现象,同时佛手酚、佛手柑内酯的含量提高了25.96％、33.33％.结论:VC为本研究中的佳抗褐化剂,能在抑制悬浮细胞褐化的同时,有效地促进细胞生长和次生代谢产物的积累.
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乌头子根芽眼组织培养中抗褐化剂的筛选
目的:筛选乌头子根组织培养芽萌发的佳抗褐化剂.方法:利用乌头子根的芽眼为外植体,在组培芽的萌发阶段,考察不同浓度配比的聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、活性炭(AC)、硝酸银(AgNO3)和硫代硫酸钠(Na2S2O3)对乌头子根芽培养中抗褐化的影响.结果:褐化集中发生在接种的10 d内,AC能有效控制褐化,乌头子根外植体在4 g/L AC培养基中5d时的褐化率低(7.7％),10 d时褐化率仅为22.1％,此浓度下外植体萌发率也高(81.7％).4种抗褐化剂对外植体生长影响方面,AgNO3处理的芽眼生长状态较好,浓度4 mg/L处理的芽眼可分化丛生芽3个,分化率为24.2％.结论:乌头子根芽眼的组织培养中,先在添加4g/L AC的培养基中培养10 d后,转入添加4 mg/L AgNO3的培养基,在有效控制褐化的同时,促进外植体的生长与增殖.
