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nNOS基因文献资料
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地高辛标记的大鼠nNOS mRNA探针的制备和应用
目的制备大鼠神经元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,nNOS)地高辛(digoxigenin)标记的RNA探针,探讨nNOS在脊髓中的表达定位.方法采用RT-PCR方法,从大鼠脑组织中扩增nNOS基因mRNA部分片段,并经序列测定.以dig-nNOS mRNA为探针,采用原位杂交观察成年大鼠脊髓组织中nNOS mRNA表达.结果 RT-PCR法扩增出一特异产物与预期长度240 bp相符,T载体克隆测序与nNOS基因100%同源.原位杂交结果显示阳性信号出现在成年大鼠脊髓组织中.结论采用RT-PCR和T载体技术获得了大鼠脑组织nNOS基因克隆,dig-nNOSmRNA探针原位杂交显示正常SD大鼠腰段脊髓组织中表达nNOSmRNA.
