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荧光共聚焦文献资料
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血小板源miR－142－3 p对血管内皮细胞增殖和凋亡的影响及机制
目的：探究血小板源微体介导的miR－142－3p转移对血管内皮细胞增殖和凋亡的影响。方法：芯片预测血小板中高表达而内皮细胞中低表达的miRNA；thrombin刺激SD大鼠源血小板， CD62P标记流式细胞术检测释放微体的数量， qPCR检测miR－142－3p和阳性对照miRNA－223的表达水平；荧光共聚焦显微镜观察血小板源微体黏附过程；Western blotting 和双萤光素酶报告实验验证miR－142－3p与靶基因的作用关系；ELISA BrdU试剂盒检测细胞增殖；cleaved caspase－9 ELISA试剂盒和annexin V／PI双标流式细胞术检测细胞凋亡；miR－142－3p inhibitor和mimics用于研究细胞功能和相关信号通路。结果：根据芯片预测结果筛选miR－142－3p为血小板中高表达、内皮细胞低表达的miRNA。血小板源微体刺激内皮细胞，通过黏附后融合将miR－142－3p转移入内皮细胞进而调控靶基因。通过miRNA靶基因预测软件和IPA筛选，预测BCLAF1为miR－142－3p的靶基因并通过双萤光素酶报告实验予以证实。血小板源微体以及miR－142－3p mimics刺激内皮细胞，BCLAF1蛋白表达显著降低，内皮细胞增殖明显增加，凋亡明显降低。结论：血小板源miR－142－3p可通过微体进入内皮细胞，调控内皮细胞增殖和凋亡，具有潜在临床应用前景。
