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"肚子拥有智慧"
为什么人在生气时,常常会感到胃疼呢?美国纽约哥伦比亚大学神经学家迈克·格肖恩认为:"那是由于我们的肚子里有个大脑."实际上,先发现这一现象的是19世纪中期的德国精神病医学家莱奥波德·奥尔巴赫.在一次用简易显微镜观察被切开的内脏时,他惊奇地发现,肠壁上附着两层由神经细胞和神经束组成的薄如蝉翼的网状物.奥尔巴赫当时并不知道他发现的正是人体消化器官的总开关.这个总开关不仅能分析营养成分、盐分以及水分,而且能对吸收和排泄进行调控,并可以精确平衡抑制型与激动型神经传递物、荷尔蒙以及保护性分泌物.
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光学显微镜及透射电子显微镜下观察内界膜分析
特发性黄斑裂孔发病率较低,但却是进行性恶化的病变,一旦形成黄斑裂孔自愈及保持视力稳定的可能性不大,大部分病例黄斑裂孔逐渐扩大、视力减退,手术是主要治疗方式。黄斑裂孔的内界膜表面的细胞增殖成分可能向肌纤维母细胞样分化;它们的收缩造成了黄斑裂孔扩大。病理状态下的内界膜可以成为视网膜色素上皮细胞(RPE )、M üller细胞和星形细胞增生的支架,说明ILM 参与了黄斑裂孔的发展扩大过程。本研究用光学显微镜及透射电子显微镜观察手术中从黄斑裂孔边界剥离膜状组织的组织结构。
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维生素E琥珀酸酯诱导人白血病细胞凋亡的发生
本研究选择两株人白血病细胞Raji(人单核细胞白血病细胞株)、Jurkat(人T淋巴细胞白血病细胞株),体外比较观察了VE和VES对细胞的生长抑制作用及其与诱发细胞凋亡的关系.检测指标及结果如下:(1)维生素E和VES诱导细胞凋亡的形态学观察.倒置显微镜下观察维生素E和VES作用72 h后的Raji细胞;制备单细胞层涂片,4℃固定、Hoechst 33258避光染色后,荧光显微镜观察.倒置显微镜下,VES组细胞透亮性下降,并见颗粒、碎片,台盼蓝染色大多为阳性.荧光显微镜下,对照培养细胞的胞核大多数大小一致、染色均匀,VES处理组细胞可见随作用剂量增加而逐渐增多的凋亡细胞核.维生素E处理组的上述改变较相同剂量VES组轻.(2)维生素E和VES对细胞的生长抑制作用.Raji.jurkat细胞分装于24孔培养板,设维生素E组(5、10、20μg/mL)、VES组(5、10、20μg/mL),空白对照组、乙醇对照组、丁二酸组,台盼蓝排除法5 d计数.维生素E和VES对Raji、Jurkat细胞的生长均具有程度不一的抑制作用,维生素E对Jurkat细胞的抑制作用较弱,而Raji细胞对维生素E和VES的反应更为敏感,20μg/mL的VES在24h的抑制率达到30%,72 h抑制率为100%,并表现出时间效应和剂量效应的关系.(3)流式细胞仪检测维生素E和VES诱导细胞凋亡.
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显微镜观察药物敏感性检测技术及其在结核病诊断和耐药性检测中的应用
自20世纪80年代以来,结核发病率又呈上升趋势,据WHO估计,全球约有20亿人患有结核病,每年有880万新发病例,死亡人数约为200万[1].同时,耐药结核病也随之增多,使结核病的诊断及治疗变得更为困难.
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脊髓DAD2受体介导的抗炎症痛作用与中枢阿片肽系统的关系
在以往的实验中我们发现,脊髓中DAD2受体可以介导明显的抗炎症性痛作用,但其作用途径及机制尚不清楚.脊髓中的阿片肽能神经元主要作为中间神经元而存在于背角的胶状质中.脊髓中DAD2受体介导的抗炎症痛作用是否通过脊髓内阿片肽系统而实现呢?本实验拟采用鞘内注射(i.t.)与免疫荧光双标结合激光共聚焦扫描显微镜观察的方法来阐明此问题.
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中药诱导肿瘤细胞自噬研究
自噬(autophagy)又称为Ⅱ型程序性细胞死亡(type Ⅱ programed cell death),是以胞质内出现双层膜结构包裹长寿命蛋白和细胞器的自噬体为特征的细胞“自我消化”的一系列生化过程,是一种在正常细胞和病态细胞中普遍存在的真核细胞特有的生命现象,在维持细胞自我稳态、促进细胞生存方面起重要作用.早在1962年,Ashford和Porten用电子显微镜观察人肝细胞时发现了自噬现象,但直到近10年,随着酵母模型的建立和基因技术的发展,人们对自噬分子机制和形态特点等研究的深入,才认识到自噬与人类的多种疾病(特别是恶性肿瘤)密切相关.通过对自噬作用的研究,可进一步揭示肿瘤发生、发展的潜在机制,为肿瘤的预防和治疗提供新的思路.
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DiI在人体神经解剖学中的应用
免疫荧光细胞化学是根据抗原抗体反应原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光素制成荧光标记物,再用这种荧光标记抗体(或抗原)作为分子探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体).在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有荧光素,利用荧光显微镜观察标本,荧光素受激发光的照射而发出明亮的荧光,可以看见荧光所在的细胞或组织,从而确定抗原或抗体的性质和定位,以及利用定量技术测定含量.
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肝穿细胞学涂片诊断不常见肿瘤4例报告
经B超或CT定位,皮肤消毒,用9号带槽套管针对肝脏肿块进行穿刺,穿出物立即涂片,固定于甲醇溶液中,常规HE染色,显微镜观察.现将肝穿细胞涂片中4例不常见的肿瘤类型介绍如下:
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乳腺肿块1115例针吸细胞学临床病理分析
乳腺肿块针吸细胞学(fine needle aspiration cytology,FNAC)诊断是一种简便、快速、经济和准确的诊断技术,特别是对乳腺癌的早期发现具有较高的诊断价值[1,2].本文对1115例乳腺肿块FNAC临床病理资料进行分析,以求得到认识上的提高.1 材料与方法1.1 材料收集我院1987-1998年1115例乳腺肿块FNAC病例,328例获得病理组织学对照,其中乳腺癌206例,肉瘤3例,良性病变119例.1.2 方法采用"一体化"工作程序[3],使用一次性10ml注射器,配8号普通注射针头[4,5 ].局部消毒后经皮刺入乳腺肿物内,抽足负压后从不同方向进退数次,见足量材料进入针头柄内后退针.将吸取材料涂片2-6张,吹干后染色显微镜观察.多余材料用滤纸包好及时用10%福尔马林固定,留作组织学观察.
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软组织黏液样肿瘤临床病理诊断
软组织黏液样肿瘤(myxoid tumors of soft tissue)是一组具有明显的、含有大量细胞外黏液基质特征的病变.这组肿瘤有明显不同的生物学行为:包括完全良性肿瘤、具有局部复发但没有转移的肿瘤和恶性肿瘤.这组肿瘤在临床和组织形态上似乎很相似,因而使本组疾病的诊断,给临床医师和病理医师带来了困难.显微镜观察仍然是病理诊断的基础,随着电镜、免疫组化和分子细胞遗传学不断地发展和改进,提供新的辅助诊断资料,使新的诊断标准得以发展,从而使本组疾病更易于得到正确的诊断.本文对常见的、伴有明显黏液基质软组织肿瘤的临床特点、黏液性病变的特征及组织学形态进行描述,并讨论其鉴别诊断要点.
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如何计算显微镜下视野面积
在显微镜下进行病理读片,是病理医师工作中的重要内容之一.显微镜观察和记录的结果是临床诊断的科学依据.正确标准的使用显微镜,观察和记录读片结果才具有科学性.众所周知,显微镜的成像首先是由物镜对标本放大成像,然后由目镜一次放大被人们肉眼观察到.
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美国病理医师训练浅谈
病理医师的成长是一个艰难漫长的过程,仅熟知理论无济于事,仅靠大量实践也不一定能成功,更重要的是在学习过程中不断加以分析归纳和积累,因此,病理诊断水平的提高来自于理论加实践再加思考之三者的有机结合.在此过程中,尽可能地吸收他人在训练中的有用经验,还是有帮助的.笔者收集整理美国病理医师训练的一些内容,供同道们参考.美国病理医师的训练始于医学生在医学院学习的第二年,在这期间,学生们用4-5个月的时间专门学习病理,主要采取讲大课,实验课(包括大体标本和显微镜观察),以及到医院轮转的形式.前两种形式与国内医学院的病理教学基本相似.同时,对病理有兴趣的同学还可以选择到医院的病理科去轮转,在那里主要采取小班教学,熟悉病理常规工作的一般流程.这些过程都在医学院二年级进行.
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细菌生物膜的研究进展
在自然界、某些工业生产环境(如发酵工业和废水处理)以及人和动物体内外,绝大多数细菌是附着在有生命或无生命物体的表面,以生物膜(biofilm, BF)方式生长,而不是以浮游(planktonic) 方式生长.BF是细菌在物体表面形成的高度组织化的多细胞结构,同一菌株的BF细菌和浮游生长细菌具有不同的特性.虽然人类第一次借助显微镜观察到的是人牙菌斑BF细菌,但多年来经典细菌学主要是研究浮游生长的细菌,而忽视了对BF细菌的研究[1,2].
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骨髓干细胞动员在治疗缺血性心肌疾病中的进展
心肌梗死是人类常见疾病之一,病情凶险,病死率较高.传统观念认为心肌细胞属于不可再生细胞,当心肌细胞受到损伤导致细胞死亡后,心肌细胞的总数下降,梗死区坏死的心肌细胞则被纤维瘢痕组织等所代替,发生心室重构,终导致心脏功能衰竭[1].1998年Kajstura等[2]利用共聚焦显微镜观察发现正常的成熟心肌细胞具有分裂和增殖能力, 2001年Beltrami等[3]在共聚焦显微镜下观察到梗死的心肌组织中有丝分裂过程中的纺锤小体、收缩环、核分裂和胞质分裂,心肌梗死后有少量心肌细胞发生分裂增生,使心肌是"永久性细胞"的观念受到挑战.
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谷氨酰胺、胆囊收缩素预防胃肠外营养期间胆汁瘀积的动物实验研究
目的探讨谷氨酰胺(GLN)/胆囊收缩素(CCK),在完全胃肠外营养(TPN)支持期间预防胆汁瘀积的作用,分别阐明GLN和CCK在预防胆汁瘀积中的作用机制及其相互关系.方法采用新西兰纯种白兔做TPN模型,分为四组,Ⅰ组TPN,Ⅱ组TPN+GLN,Ⅲ组TPN+CCK,Ⅳ组TPN+GLN+CCK.每组各分半数分别观察至四周和八周二个阶段后处死.经过血液生化检查、胆汁成分分析、大体形态观察、光学显微镜观察和电子显微镜扫描,对比观察各组每个阶段有否胆汁瘀积、胆囊形态变化及其程度.结果血液监测Ⅰ组GPT、AKP、直接胆红素和胆固醇在四周时较Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组有升高趋势,第八周时有明显升高.胆汁检验Ⅰ、Ⅱ组第四周时直接胆红素和胆固醇较Ⅲ、Ⅳ组有较明显升高.光镜、电镜扫描示工、Ⅲ组胆囊壁第四周时上皮呈矮柱状、着色逐渐加深、细胞内水肿、线粒体轻度肿胀,第八周时工、Ⅲ组胆囊壁在固有膜和肌层间出现了明显间隙,胞浆混浊,内有较大脂滴,内质网有空泡形成,而Ⅱ、Ⅳ组胆囊壁四周时呈正常细胞器官,八周时Ⅱ组有轻度改变,Ⅳ组仍为正常的细胞器官.结论TPN支持期间确能发生胆汁瘀积,而且时间越长其程度越严重.TPN+GLN可以保护维持胆囊壁组织细胞的完整和功能,但无直接预防胆汁瘀积作用.TPN+CCK具有明显缩胆和促进胆汁排泄作用,但若胆囊壁受损,CCK将失去其作用.TPN+GLN+CCK不仅具有保护和维持胆囊壁组织细胞的完整性和功能,而且还有明显的缩胆囊、促进胆汁排泄的作用,证明是预防TPN支持期间胆汁瘀积的佳方法.
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流式细胞术及DNA倍体分析在胃肿瘤研究中的新进展
消化道肿瘤及癌前病变的诊断和分级由于以病理学家借助光学显微镜观察这一认识过程中有一定的主观性,流式细胞术在肿瘤研究方面已成为重要的手段之一,近年来已引起肿瘤研究者的极大关注,本文对流式细胞术的应用及进展综述如下:
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Mg-Mn-Zn合金介导成骨作用研究
目的::建立Mg-Mn-Zn合金介导的成骨作用模型,为进一步研究体内成骨机制奠定基础。方法:一月龄雄性SD大鼠12只,麻醉后股骨干穿通性钻孔造成骨创伤,植入Mg-Mn-Zn合金介导棒,同时注入庆大霉素预防感染,每周皮下注射钙黄绿素。术后5、9、18、26周分别随机处死3只大鼠,取出植入有介导金属棒的股骨,各组材料经体视显微镜、光镜、扫描电镜、倒置荧光显微镜观察并行能量色散谱元素分析,岛津EPMA1610电子探针显微分析仪测试样品内镁、钙、磷元素分布。结果:体视镜及光镜观察见5、9、18、26周髓腔中金属移植物周围包裹有新生骨,倒置荧光显微镜观察见移植物周围有新骨生成。能量色散谱元素分析表明含有碳、氧元素的基底膜层在金属移植物周围形成。电子探针显微分析表明介导金属棒周围与成骨作用有关的钙、磷元素丰富。结论:成功的制作了Mg-Mn-Zn合金介导的体内成骨作用模型。结论:Mg-Mn-Zn合金能够很好的介导体内成骨。
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肥大细胞活化在高脂饲养大鼠胰岛纤维化形成中的作用
目的::探讨胰腺肥大细胞( MC)活化在高脂饲养大鼠胰岛纤维化发生中的作用。方法:8周龄雄性SD大鼠40只随机分为2组,正常饲养组(NC, n=20)、高脂饲养组(HF, n=20),每组各20只。每组大鼠饲养20周后检测空腹血糖、血胰岛素( Ins)、胰高糖素( Glc)、游离脂肪酸( FFA);正常血糖高胰岛素钳夹评价外周胰岛素抵抗程度;胰岛细胞表面灌注评价β及α细胞分泌功能;检测外周血炎症指标:TNF-α、IL-6,取胰腺组织制片,甲苯胺蓝染色显示肥大细胞并计数定量,免疫组织化学标记胰岛IL-6、TNF-α、苦味酸-天狼星红胶染色鉴别胰岛内沉积的胶原纤维类型。结果:(1)HF组大鼠葡萄糖输注率(GIR)明显低于NC组,血Ins、Glc、FFA水平显著高于NC组;(2)HF组大鼠葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS)功能明显下降( P<0.01);HF组大鼠基础Glc的分泌是NC组的3倍( P<0.01),16.7 mmol/L葡萄糖灌注后Glc分泌未受抑制;(3) HF组大鼠胰岛纤维化,肥大细胞数量明显增多,部分细胞呈脱颗粒状。肥大细胞IL-6呈阳性表达。苦味酸-天狼星红胶染色结果:根据胰岛内纤维化的范围,将胰岛纤维化程度分为轻、中、重三度:轻度纤维化范围<30%;中度纤维化范围在>30%<60%之间;重度纤维化范围>60%胰岛纤维化,偏振光显微镜观察胰岛内沉积的纤维,主要为I型及III型胶原纤维,炎细胞浸润。结论:长期高脂饲养脂毒性使肥大细胞增生、活化脱颗粒释放致炎因子IL-6、TNF-α从而促进了胰岛内胶原纤维沉积。
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BMP-2和 PFT-α对骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化的影响
目的::探索骨形态发生蛋白2( BMP-2)、P53抑制剂( PFT-α)以及二者联合诱导对大鼠骨髓间充质干细胞( BMSCs)向心肌细胞分化的影响。方法:分离4周龄SD大鼠的骨髓间充质干细胞并进行体外培养,对第二代BMSCs定向诱导,依次为BMP-2组、PFT-α组、BMP-2+PFT-α组以及空白对照组,相差显微镜观察细胞的形态学变化。免疫细胞化学法检测诱导4周后心肌特异性标记物(α-actin、C-TnT、desmin、P38-Mark)的表达,并进行统计学分析;透射电镜观察细胞的内部结构。结果:诱导4周后,诱导组大鼠BM-SCs的细胞形态变长,呈杆状,紧密平行排列,方向一致;空白对照组大鼠BMSCs细胞呈星形或三角形。免疫细胞化学检测显示:各诱导组BMSCs均可见α-actin、C-TnT、desmin、P38-Mark阳性的细胞,其中联合诱导组的阳性表达率高于BMP-2或PFT-α单独诱导组,诱导各组与对照组的以上各标记物的阳性率具有统计学差异( P﹤0.05)。透射电镜结果显示:诱导组大鼠BMSCs细胞呈分支杆状,核卵圆形,且位于细胞中央,细胞质中有肌丝平行排列,可见线粒体、大量粗面内质网、核糖体等。结论:BMP-2、PFT-α均可诱导BMSCs向心肌样细胞分化,且两者联合应用效果强于单一应用的效果。
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食管、贲门癌染色体异常分析及意义
目的:研究食管、贲门癌细胞染色体异常及意义.方法:16例食管癌,3例贲门癌采用比较基因组杂交技术,以不同荧光染料分别标记正常人胎盘DNA和癌细胞DNA,与人中期染色体杂交,用荧光显微镜观察摄取图像,通过专用分析软件,确定染色体DNA的扩增和缺失.结果:食管、贲门癌同一患者可出现多条染色体扩增和缺失,可出现整条染色体或长臂或短臂或某一染色体上DNA位点的扩增或缺失,常见扩增有3q,17q,20q,8q,9q,11q,5p,17p;缺失为4q,4p,9q,18q;6例有8q扩增者,病变均侵犯食管壁全层、邻近组织且伴淋巴结转移.染色体DNA扩增数目多的见于Ⅱ期患者,Ⅰ期少.结论:食管、贲门癌细胞染色体DNA扩增和缺失与病变的发生、发展、转移和分期有关.